双抗夹心酶联免疫风疹病毒快速诊断试剂盒的制备

摘要

风疹病毒是披膜病毒科风疹病毒属中的唯一成员，其自然储存宿主是人。虽然风疹病毒的感染对于儿童或者成年人是一种良性的传染病，但是在女性妊娠早期感染却会导致新生儿的先天畸形。检测、诊断风疹疾病对于提高优生诊断措施，预防不良疾病有着重要的意义。 我国目前关于风疹病毒感染的诊断，主要有以下几种模式：病毒学检验、血清学检验以及应用分子生物学技术的PCR鉴定。但是由于单方面诊断风疹感染被认为是不可靠的，因此普遍认为多种方式联合应用检验会具有更另人信服的检验结果。胶体金免疫层析技术是近年来新发展起来的一种快速、方便、小误差的检验技术，已经被广泛应用在检测早孕试纸。由于其日趋成熟的技术应用以及多种其他方法所无法比拟的优点，已经有越来越多的人把目光集中在这一技术上。目前国内大部分仍然依靠进口产品或者相关技术，生产胶体金免疫层析技术检测风疹病毒感染的试纸条，因此从市场的角度而言，具有很广阔的应用前景。 本课题的立意在于应用金胶免疫层析技术与单克隆抗体技术相结合，开发出一种能够同时检测TORCH五种抗原的快速诊断试纸条，一方面可以减少妊娠期妇女健康检查所需的时间和费用，另一方面可以填补国内此类产品没有规模生产的空缺。本论文是整个课题的一个部分，即抗风疹病毒单克隆抗体的制备以及快速诊断试纸条的初步探索。本实验对鼠源抗风疹单克隆抗体的制备、鉴定以及采用酶联免疫检测技术制备ELISA风疹快速诊断试剂盒进行了初步的尝试。其结果显示：成功建立了3株稳定分泌单克隆抗体的细胞株，分别命名为E7，D6，G3。相应IgG亚类分别为IgG2b、IgG2b、IgGM，均与RV抗原有强阳性反应。在此基础上，初步确立了以酶联技术为核心的诊断方案。

目录

独创性声明及保护知识产权声明

缩略词

第一部分文献综述

第二部分病毒培养及纯化

第三部分抗风疹病毒单克隆抗体的制备

第四部分单克隆抗体的鉴定

第五部分酶联免疫风疹病毒快速诊断试剂盒的制备

第六部分总结

参考文献

附

致谢