氯沙坦对AngⅡ诱导肾小管上皮细胞转分化抑制作用及机制研究

摘要

目的:探讨氯沙坦对AngⅡ诱导的肾小管上皮细胞转分化的作用的抑制作用及其作用机制可能与核转录因子-KB活性变化的关系。 方法:以人类正常的肾小管细胞株HK-2为研究对象；实验分组1(观察AngⅡ，losartan在不同的浓度，时间对细胞的影响)：①正常对照组(加无血清培养基)：②AngⅡ(10<'-6>mmol/L)组；③AngⅡ(10<'-7>mmol/L)组；④AngⅡ(10<'-8>mmol/L)组；⑤AngⅡ(10<'-9>mmol/L)组：⑥losartan(0.1ng/ml)组；⑦losartan(1ng/ml)组：⑧losartan(10ng/ml)组；⑨losartan(100ng/ml)组。各组分别检测12h、24h、48h、72h，用MTT、流式细胞仪筛选药物浓度。实验分组2(AngⅡ10<'-7>mmol/L诱导HK-2，Losartan不同浓度，时间干预作用)：①正常对照组(加无血清培养基)；②AngⅡ10<'-7>mmol/L组：③Losartan(0.1ng/ml、1ng/ml、10ng/ml组)；④AngⅡ10<'-7>mmol/L+Losartan(0.1ng/ml、1ng/ml、10ng/ml)组，各组分别检测24h、48h、72h，应用相差显微镜、电镜观察细胞形态及超微结构变化，免疫荧光检测细胞CK-8，α-SMA变化及逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)方法检测HK-2细胞NF-KBmRNA含量的变化。 结果:AngⅡ(10<'-6>mmol/L)在干预72 h，对HK．2的凋亡率最高，达14.2﹪，AngⅡ(10<'-7>mmol/L)在干预72 h，对HK-2增殖率最大，达25.6﹪，氯沙坦+AngⅡ组比AngⅡ组HK-2内CK-8表达有所增强，而α-SMA的表达减弱；同时HK-2NF-кB的活性AngⅡ组随时间的延长表达增强(P<0.05)，而氯沙坦干预后NF-кB的活性明显下降(P<0.05)。 结论:①氯沙坦可在一定浓度范围内抑制AngⅡ诱导的体外培养HK-2转分化。②氯沙坦抑制AngⅡ诱导的体外培养HK-2转分化很可能与NF-кB的表达下调有关，需要进一步研究。

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