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贵阳市两种人群及媒介、宿主动物SFTSV感染情况初步调查

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1 材料、试剂与器材

1.1材料

1.2主要实验试剂

1.3 主要实验器材

1.4伦理学支持

2 实验方法

2.1 无偿献血人群标本收集

2.2.不明原因发热患者样本收集

2.3 无偿献血人群样本新布尼亚病总抗体ELISA检测及抗体滴度分析

2.4 不明原因发热患者样本新布尼亚病总抗体ELISA检测及抗体滴度分析

2.5 全血总RNA提取(Trizol法)

2.6 蜱虫采集、处理及保存

2.7 蜱虫总RNA提取(Trizol法)

2.8鼠类捕捉及脏器标本处理保存

2.9 鼠脾脏总RNA提取(Trizol法)

2.10 将RNA逆转录成cDNA(试剂盒法)

2.11 PCR扩增

2.12 琼脂糖凝胶电泳

2.13质量控制

2.14 统计学方法

3 结果

3.1 无偿献血人群SFTSV总抗体感染情况特征

3.2 不明原因发热患者SFTSV感染情况

3.3媒介动物感染情况

3.4 媒介动物感染情况

4 讨论

5 结论

参考文献

综述:新发经输血传播病原体流行病学及检测方法的研究进展

致谢

作者简介

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摘要

目的:初步分析贵阳市无偿献血人群及不明原因发热患者新布尼亚病毒流行特征,并调查新布尼亚病毒的媒介动物及宿主动物的感染情况,为贵阳市新发传染病防控工作提供数据支持。
  方法:1.2015-2016于贵州省血液中心收集无偿献血人群血液样本,保存于-80℃冰箱,录入并整理基本资料。将无偿献血人群样本血清进行新布尼亚病毒总抗体ELISA检测(重复检测2次),并将基本资料进行整理分析,将阳性样本进行抗体滴度检测;2.2015-2016于贵州省人民医院收集发热患者血液样本,根据基本资料中获得的临床症状、血常规等筛选出不明原因发热患者50份,将样本进行ELISA检测,将阳性样本进行抗体滴度检测;3.对不明原因发热患者样本进行核酸检测;4.2015-2016年于贵阳市森林公园采取布旗法进行游离蜱虫捕捉,在贵阳市内宠物医院获取寄生蜱虫,并将蜱虫样本于EP管中保存于-80℃冰箱;对SFTSV媒介动物蜱虫样本进行核酸检测;5.2015-2016年于贵阳市东山附近采取夜笼法捕捉鼠类,将其脾脏进行处理,于EP管中保存于-80℃冰箱;对SFTSV宿主动物鼠类样本进行核酸检测。
  结果:1.本次课题调查的无偿献血人群中共有SFTSV总抗体阳性样本63例,占总检测人群的5.31%,阳性样本抗体效价在1:2-1:64之间,其中1例抗体效价为1:64。“5月-10月”阳性率高于“11月-4月”,即夏秋季节高于冬春季节,差异有统计学意义,x2=4.623,P<0.05;2.50份不明原因发热患者中,ELISA检测4份为阳性,阳性率为8%,阳性抗体效价介于1:2-1:32之间,其中1例抗体效价为1:32;3.不明原因发热患者核酸检测结果均为阴性;4.初步采集SFTSV媒介动物蜱虫,核酸检测结果均为阴性;5.初步采集SFTSV宿主动物鼠类,核酸检测结果均为阴性。
  结论:1.贵阳市无偿献血人群中可能存在SFTSV感染的情况;2.不明原因发热患者中可能存在SFTSV感染情况;3.初步调查不明原因发热患者中未发现SFTSV病原感染者;4.初步采集媒介及宿主动物,未发现SFTSV感染。

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