淫羊藿素对K562细胞增殖及细胞内活性氧的影响

摘要

目的：
　　探讨淫羊藿素（Icaritin,ICT）对慢性粒细胞白血病（Chronic myeloid leuke-mia,CML）K562细胞增殖及细胞内活性氧（Reactive oxygen species,ROS）的影响。
　　方法：
　　MTT法检测ICT对K562细胞增殖的影响；流式细胞术检测K562细胞的凋亡及细胞内活性氧情况；Western blot法检测PARP蛋白表达变化。
　　结果：
　　1.不同浓度ICT（0μmol/L、2μmol/L、4μmol/L、8μmol/L、16μmol/L和32μmol/L）作用于K562细胞48h后，具有抑制K562细胞生长增殖的作用，抑制率分别为（0）、（6.3±1.48）％、（25±1.86）%、（32±3.07）%、（66±2.07）%、（76±1.68）%、（80±3.69）%，呈浓度依赖性变化(r=0.837)，药物作用K562细胞48h的IC50（半数抑制浓度）为12.41μmol/L。
　　2.不同浓度ICT（0μmol/L、2μmol/L、4μmol/L、8μmol/L、16μmol/L和32μmol/L）作用于 K562细胞48h后，诱导其凋亡率分别为（0.6±0.38）%、（0.66±0.41）%、（6.36±1.56）%、（23.01±0.59）%、（30.24±2.11）%、（36.01±1.69）%，呈明显剂量关系(r=0.904)。
　　3.不同浓度ICT（0μmol/L、2μmol/L、4μmol/L、8μmol/L、16μmol/L和32μmol/L）作用于K562细胞48h后，随着ICT的浓度增加，PARP89KD裂解片断明显增多，PARP蛋白表达增加。
　　4.不同浓度ICT（0μmol/L、2μmol/L、4μmol/L、8μmol/L、16μmol/L和32μmol/L）处理K562细胞48h后，ROS平均荧光强度百分比随着浓度的升高而逐渐上升（74.34±2.08、84.86±1.46、90.14±3.37、88.82±7.38、88.4±1.87），（r=0.60），且明显高于空白对照组（45.175±19.82）（P<0.01）。
　　结论：
　　ICT具有抑制K562细胞生长增殖，并诱发其凋亡的作用，其机制可与ROS升高有关。

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第一章 前言

1.1 白血病概述

1.2淫羊藿素概述

1.3 活性氧概述

1.3.1 活性氧的产生和来源

1.3.2 活性氧的清除

1.3.3 活性氧的检测

1.3.4 活性氧与致癌作用

1.3.5 活性氧与抗癌作用

1.3.6 活性氧积极作用

第二章 材料与方法

2.1 实验材料

2.1.1 实验对象（细胞株）

2.1.2 实验相关试剂

2.1.3 主要实验仪器

2.1.4 主要耗材

2.1.5 主要试剂的配制

2.2 实验方法

2.2.1 细胞复苏、培养及冻存

2.2.2 实验过程

3 统计学分析

第三章 实验结果

3.1 淫羊藿素对K562细胞生长效应的影响

3.2 淫羊藿素对K562细胞凋亡效应的影响

3.3 淫羊藿素对K562细胞PARP表达效应的影响

3.4 淫羊藿素对K562细胞内活性氧水平的影响

第四章 讨论

第五章 研究结论及展望

5.1 本研究主要结论

5.2 研究展望

参考文献

综述:淫羊藿素抗肿瘤作用的研究进展

英文缩略词表

在学期间研究成果

致谢