苯扎氯铵对角膜神经支配的影响

摘要

目的:苯扎氯铵(Benzalkonium Chloride，BAK or BAC)是目前眼科用药中应用最广的防腐剂。本研究旨在探讨临床常用浓度的BAK对角膜神经支配的影响。
　　方法:随机将54只成年新西兰大白兔分为3组，用浓度为0.005％、0.01％、0.02％的苯扎氯铵溶液对每组兔的单眼点眼，每日一次，持续9天，对侧未处理眼作为空白对照。在试验的第0、3、6、9天检测角膜敏感度、泪液分泌、泪膜破裂时间(tear break-up time，BUT)以及荧光染色和玫瑰红染色评分，并将BAK处理眼和对照眼的结果进行比较。试验第9天，运用活体共聚焦显微镜观察中央角膜的结构。在试验第3、6、9天取下角膜，用神经特异性的抗体β-tubulinⅢ标记神经纤维，进行免疫荧光染色并定量分析角膜上皮表层的神经末梢，基底下神经以及基质神经的密度。
　　结果:与对照组相比，眼表局部应用BAK第3天角膜敏感度下降，玫瑰红染色评分升高，而泪液分泌、BUT、角膜荧光着色评分均无显著差异。角膜上皮表层和基底层的神经纤维密度分别在试验第3天和第6天时出现降低。试验第9天，0.02％BAK处理组的泪液分泌减少，BUT减低，角膜基质神经纤维密度降低，且荧光素染色评分升高。与对照组相比，各浓度BAK处理组的角膜上皮表层细胞均显著增大。
　　结论:局部应用BAK可在未出现泪液缺乏的情况下引起角膜知觉减退。BAK诱导的角膜神经支配的变化与眼表的改变是相关的。检测整体角膜神经可能能够成为一种新的客观定量评价BAK的角膜毒性作用的方式。

目录

声明

摘要

第一章 前言

1．1 苯扎氯铵在滴眼液中的应用

1．2 苯扎氯铵对角膜的影响

1．2．1 对角膜上皮的影响

1．2．2 对角膜基质的影响

1．2．3 对角膜内皮的影响

1．3 苯扎氯铵对角膜神经的影响的相关研究

1．4 本研究的目的及意义

第二章 材料与方法

2．1 实验材料

2．1．1 实验动物

2．1．2 给药方式

2．1．3 主要仪器

2．1．4 主要试剂

2．2 实验方法

2．2．1 临床指标

2．2．2 活体共聚焦显微镜检查

2．2．3 免疫荧光染色

2．2．4 HE染色

2．2．5 统计学分析

第三章 结果与分析

3．1 临床指标

3．1．1 角膜荧光染色与泪膜破裂时间

3．1．2 玫瑰红染色

3．1．3 角膜知觉

3．1．4 泪液分泌

3．2 活体共聚焦显微镜检查

3．3 免疫荧光染色分析

3．4 组织学分析

第四章 讨论

第五章 结论

第六章 展望

参考文献

附录1 缩略词索引

附录2 硕士在读期间相关成果

致谢