NB-UVB治疗白癜风复色模式的观察及白癜风表皮与Hacat细胞组织工程皮肤的构建

摘要

目的1、观察292块白癜风皮损经窄谱中波紫外线（Narrowband ultraviolet B，NB-UVB）治疗后的复色模式，并分析其原因。2、在人去表皮的真皮组织（de-epidermized dermise，DED）表面，构建白癜风白斑区表皮与Hacat细胞组织工程皮肤，观察其结构及黑素颗粒的分布情况。
　　方法1、使用Waldmann801KL型紫外线皮肤治疗仪，经改进的NB-UVB光疗方案对白癜风患者进行治疗，对其中的292块白癜风皮损在每次治疗前、治疗中、治疗12周后观察其复色情况，并对不同性别、年龄、部位、病程的复色模式进行统计学分析。2、Hacat细胞用10％DMEM-H培养基进行培养及传代，取对数生长期的细胞接种于含有基底膜成分的DED组织表面，并采用BY—II AM型表皮移植治疗仪，对稳定期白癜风患者进行负压吸引发疱，将白斑区疱壁剪下并移植至已接种了Hacat细胞的DED，进行浸液培养和空气-液面相结合的方式培养，14天后固定组织，HE染色与免疫组化观察结构形态与分布，Masson-Fontana银氨法和硫酸亚铁法染色观察黑素颗粒的分布情况。本实验中所涉及到的统计分析由SPSS19.0统计软件完成。
　　结果1、292块白癜风皮损经过NB-UVB治疗12周后对其进行复色模式的评估。其中，109块（37.3%）皮损出现毛囊周围复色，111块（38.0%）为皮损边缘复色，19块（6.5%）为弥散性复色，51块（17.5%）为混合复色，2块（0.7%）为特殊类型的环状复色。多数的皮损为边缘复色及毛囊复色模式，其次为混合、弥散及环状的复色模式。根据患者性别、年龄、皮损的部位、病程与复色模式进行统计学分析，其中，与性别、年龄、皮损部位差异有统计学意义（卡方检验，P<0.05），与病程无显著性差异（卡方检验，P>0.05）。2、肉眼可观察到DED在接种Hacat细胞后颜色无明显变化，白癜风白斑区表皮与DED贴附紧密。HE染色可见与Hacat细胞共培养后细胞均匀分布于DED表面的基底膜带上，并呈条带状分布，部分区域呈多层堆积生长，并在凹陷处形成大小不等的细胞团，表皮贴附Hacat细胞表面生长。Masson-Fontana银氨法与硫酸亚铁染色可见黑素颗粒在白斑区表皮基底聚集或散在分布，部分Hacat细胞中可见黑素颗粒，两种染色法黑素颗粒分别呈黑色与墨绿色。
　　结论1、患者不同性别、年龄、皮损部位的复色模式有显著性差异。2、白癜风白斑区表皮可与 Hacat细胞共同构建组织工程皮肤。3、白癜风白斑区中仍有黑素颗粒；部分黑素颗粒可传递到Hacat细胞中；为进一步研究白癜风奠定了实验基础。

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