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促红细胞生成素对SD大鼠坐骨神经损伤后Caspase-3和GAP-43表达及神经修复的影响

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前言

一 、材料与方法

1.1 主要实验仪器

1.2 主要实验试剂

1.3 实验技术路线图

1.4实验动物及分组

1.5动物实验方法

1.6坐骨神经功能指数(SFI)检测

1.7坐骨神经组织学观察

1.8PCR检测脊髓组织内Caspase-3、GAP-43表达

1.9 统计学分析处理

二、结果

2.1坐骨神经功能指数(SFI)检测结果

2.2 组织学观察结果

2.3 PCR检测结果

三、讨论

3.1神经系统的损伤机制

3.2 EPO对周围神经损伤的保护、修复作用机制

3.3 Caspase-3

3.4 GAP-43

四、展望

五、结论

参考文献

致谢

综述

参考文献

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摘要

目的:探讨促红细胞生成素(EPO)对SD大鼠坐骨神经损伤后相应节段脊髓组织内Caspase-3和GAP-43表达情况及神经修复的影响,为临床治疗周围神经损伤提供实验性依据。
  方法:生长发育正常的洁净SD大鼠45只,雌雄不限,按照随机原则分为3个组,即对照组、模型组和实验组,每组15只。坐骨神经损伤模型制作方法:大鼠麻醉完全后取俯卧位固定,手术区域常规消毒、覆盖无菌单,在右侧大腿中部梨状肌下充分暴露坐骨神经后用普通外科持针器压榨坐骨神经2次,每次30秒钟,间隔10秒钟,损伤长度约为2 mm。对照组正常饲养,模型组每日腹腔注射生理盐水,实验组每日腹腔注射促红细胞生成素。于术后的1w、2w、3w每组随机提取5只大鼠行坐骨神经功能指数检测,受损坐骨神经组织学观察,PCR方法检测相应节段脊髓组织内Caspase-3和GAP-43的表达情况。
  结果:坐骨神经功能指数检测显示对照组各时间段正常,模型组与实验组显著降低,但第1w无明显差异(P〉0.05),第2w、3w实验组神经功能恢复明显优于模型组(P〈0.05)。HE染色显示对照组坐骨神经组织结构基本正常,神经纤维排列整齐、染色较均匀,组织未见明显水肿和炎细胞浸润;模型组的组织切片显示轴突肿胀明显、空泡变性,细胞核固缩,神经组织肿胀,炎细胞浸润明显;实验组同期病理表现较模型组明显减轻。相应节段的脊髓组织Caspase-3和GAP-43在对照组呈低表达状态,模型组和实验组在神经损伤后表达均增加,第1w两组表达情况差异较轻微,第2w、3w实验组Caspase-3表达较模型组明显减少,GAP-43实验组较模型组表达明显增加。
  结论:EPO可能通过抑制受损神经组织相应节段脊髓内Caspase-3的表达,促进GAP-43的表达,对SD大鼠坐骨神经损伤发挥保护、修复作用。

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