6966例孕妇外周血胎儿游离DNA检测结果分析

摘要

目的：
　　通过分析孕妇外周血胎儿游离DNA（cell-free fetal DNA，cffDNA）检测结果，评价21-三体（Trisomy21，T21）、18-三体（Trisomy18，T18）、13-三体（Trisomy13，T13）和性染色体非整倍体（sex chromosome aneuploidy，SCA）的筛查效率，探讨其临床应用价值，为指导产前遗传咨询，减少出生缺陷，提高人口素质提供参考依据。
　　资料与方法：
　　收集2015年01月01日至2016年09月30日在福建省妇幼保健院产前诊断中心就诊，知情同意后接受孕妇外周血cffDNA检测者6978例，剔除检测失败12例，对6966例孕妇进行分析，年龄(31.60±5.01)岁，孕周(18.71±3.13)周。按优先指征分为血清学筛查临界风险、血清学筛查高风险、高龄孕妇（预产期≥35岁）、B超检查提示异常、不良孕产史及其他（包括错过血清学筛查时间或直接要求检测）。按不同受孕方式分为试管婴儿组和自然受孕组。抽取孕妇外周血10ml，送至湖南家辉遗传专科医院，应用高通量基因测序技术（High-throughput sequencing， HTS），检测是否存在胎儿染色体非整倍体高风险。对检测结果高风险者在知情同意后，进一步行介入性产前诊断及染色体核型分析。电话随访所有孕妇的妊娠结局及胎儿出生后情况。
　　结果：
　　1.6966例孕妇中共筛查出染色体非整倍体高风险108例，其中93例进行介入性产前诊断及染色体核型分析。(1)28例T21高风险中24例染色体核型为47，XN，+21，4例为46，XN。(2)14例T18高风险中有13例进一步行染色体核型分析，6例为47，XN，+18，7例为46，XN，1例因意外摔伤引产，未进一步确诊。(3)8例T13高风险中5例为47，XN，+13，3例为46，XN。(4)55例SCA高风险中有41例进一步行染色体核型分析，3例为45，XO，4例为47，XXX，4例为47， XXY，5例为47，XYY，4例为性染色体嵌合体，21例核型正常。(5)其他染色体高风险3例，分别为1例Chr14-，1例Chr20-，1例可疑22号/1号/12号染色体单体或部分缺失，核型分析均正常。
　　2.孕妇外周血 cffDNA检测染色体非整倍体异常的总体灵敏度为100%，特异度为99.45%，假阳性率为0.55%，阳性预测值为59.14%，阴性预测值为100%。T21、T18、T13和SCA的灵敏度均为100%，特异度分别为99.94%、99.90%、99.96%、99.70%，假阳性率分别为0.06%、0.10%、0.04%、0.30%，阳性预测值分别为85.71%、46.15%、62.50%、48.78%，阴性预测值均为100%。
　　3.血清学筛查临界风险、血清学筛查高风险、高龄孕妇、B超检查提示异常、不良孕产史和其他检测指征的染色体非整倍体异常率分别为0.60%、1.02%、0.98%、0.55%、0.50%和0.51%。B超检查提示异常中软指标异常和胎儿结构异常的染色体非整倍体异常率分别为0%和6.25%。
　　4.试管婴儿组检出染色体非整倍体4例，染色体非整倍体异常率为1.83%，与自然受孕组相比，差异无统计学意义（?2=3.139，P=0.076）。
　　5.孕妇外周血 cffDNA检测结果高风险者共随访106例，失访2例，随访率98.15%。其中核型分析确诊染色体异常者55例，48例已引产，3例47,XYY、2例47,XXY、1例47,XXX和1例45,X[12]/46,XX[90]胎儿出生后表型未见异常。核型分析正常者38例，36例电话随访胎儿出生后情况均未见异常，2例失访。未行介入性产前诊断15例，13例SCA高风险胎儿出生后表型未见异常，1例T18高风险因意外摔伤引产，1例SCA高风险因宫颈机能不全流产。低风险者6858例，共随访6581例，随访率95.96%。其中1387例孕妇尚未分娩；发现流产7例，流产率0.13%；B超提示胎儿发育停止9例，胎死率0.17%；先天畸形12例，畸形率0.23%；出生后夭折6例，死亡率0.12%。
　　结论：
　　1.孕妇外周血 cffDNA检测技术是一项具有高灵敏度、高特异度、低假阳性率的产前筛查技术。对T21、T18、T13和SCA分别有85.71%、46.15%、62.50%和48.78%的阳性预测效率。
　　2.这项技术对血清学筛查临界风险、血清学筛查高风险、高龄孕妇、B超检查提示异常、有不良孕产史和错过血清学筛查时间或直接要求检测者的胎儿染色体非整倍体异常均有检出意义。有效减少了漏诊的发生，同时避免98%以上不必要的介入性产前诊断，减轻孕妇的心理压力。
　　3.强调产前遗传咨询中应充分告知孕妇及家属检测技术的优势和局限性，由孕妇及家属根据自身情况，自愿选择检测方法。发挥技术优势、规避劣势，能更好地加强出生缺陷的二级预防，提高人口素质。

目录

声明

中英文缩略词表

前言

资料与方法

1.1研究对象

1.2适用范围

1.3方法

1.4 介入性产前诊断及染色体核型分析

1.5妊娠结局随访

1.6 统计学分析

结果

2.1研究对象的一般情况

2.2 孕妇外周血cffDNA检测情况

2.3不同指征孕妇外周血cffDNA检测结果比较

2.4 不同受孕方式孕妇外周血cffDNA检测结果比较

2.5 妊娠结局随访情况

讨论

3.1 孕妇外周血cffDNA检测技术的发展

3.2 孕妇外周血cffDNA检测染色体非整倍体的临床意义

3.3 孕妇外周血cffDNA检测技术在不同指征中的应用价值

3.4 孕妇外周血cffDNA检测技术在不同受孕方式中的检测意义

结论

参考文献

综述:孕妇外周血胎儿游离DNA检测技术的研究进展

致谢