铁营养状况及TFR2基因多态性与非酒精性脂肪肝关系的病例对照研究

摘要

目的:非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease，NAFLD)是一种遗传-环境-代谢应激相关性疾病，体内和体外实验均证实铁负荷水平与NAFLD的发生发展有关，流行病学研究却得到矛盾结果。本研究采用病例-对照研究，通过调查研究对象的膳食铁摄入情况、测定体内铁负荷水平及检测TFR2基因多态性，以探讨铁负荷与NAFLD发病风险的关系。
　　方法:
　　1.采用1:1频数匹配病例-对照研究，选取280例NAFLD新发病人及280例与其性别、年龄(±5周岁)匹配的对照。采用半定量食物频率问卷(semi-quantitative food frequency questionnaire,SQFFQ)调查研究对象的食物摄入情况，并参照《中国食物成分表》(2012年修订)计算每个调查对象膳食总铁、血红素铁、非血红素铁的日均摄入量。采用成组t检验及多因素非条件Logistic回归探讨膳食铁摄入水平与NAFLD发病风险的关系。
　　2.使用ELISA法检测血清铁蛋白(serum ferritin,SF)、铁调素(Hepcidin)、可溶性转铁蛋白受体2(soluble transferrin receptor2,sTFR2)，并计算sTFR2/SF、Hepcidin/SF的比值。采用单因素和多因素非条件Logistic回归探讨体内铁负荷水平与NAFLD发病风险的关系。
　　3.采用iMLDR技术对NAFLD患者和对照进行TFR2基因分型，采用单因素和多因素非条件Logistic回归探讨TFR2基因多态性与NAFLD发病风险的关联性，并使用R语言编写的Haplo.stats扩展包分析TFR2基因单体型与NAFLD发病风险的关系。
　　结果:
　　1．NAFLD组中膳食血红素铁的日均摄入量高于对照组[(5.20±2.27)mg/d vs(4.67±2.16)mg/d,P=0.032]，而膳食总铁及非血红素铁的日均摄入量在两组的分布差异均无统计学意义(P＞0.05)。对NAFLD危险因素进行校正后，血红素铁摄入量增高仍是NAFLD的危险因素，三分位危险度(ORs及95%CI)分别为1(参考)，1.73(0.98,1.99)，2.13(1.25,3.62)。进一步控制总能量的影响，高血红素铁膳食仍然是NAFLD的危险因素，而总铁及非血红素铁的摄入水平与NAFLD发病风险仍不存在统计学关联。
　　2．单因素非条件Logistic回归分析结果显示，与血清sTFR2第1分位数(<10.04μg/L)相比较，血清sTFR2高表达(≥19.11μg/L)可降低NAFLD发病风险，其OR及95%CI为0.56(0.36,0.86)；此外，sTFR2/SF、Hepcidin/SF比值增大也可降低NAFLD发病风险；未发现血清SF及Hepcidin表达水平与NAFLD发病风险存在统计学关联。对NAFLD危险因素进行校正后，血清SF表达水平与NAFLD发病风险存在统计学关联，与血清SF第1分位数(<123.91μg/L)相比较，血清SF高表达(≥322.94μg/L)可增加NAFLD发病风险，其OR及95%CI为1.69(1.02,2.78)；而sTFR2/SF、Hepcidin/SF比值增大可降低NAFLD发病风险；未发现血清sTFR2和Hepcidin的表达水平与NAFLD发病风险存在统计学关联。
　　3．非条件Logistic回归分析结果显示，rs4434553与NAFLD发病危险性相关(P<0.01)，与携带野生基因型者(AA)相比，突变基因型(GA+GG)携带者患NAFLD的风险性较小，校正OR值为0.45(0.25,0.81)。按性别分层分析结果显示，在男性人群中，携带rs4434553突变基因型(GA+GG)的研究对象患NAFLD的风险较携带AA基因型者小，0R为0.33(0.15,0.72)；在女性人群中，携带rs2075672突变基因型(GA+AA)，或rs1052897突变基因型(TA+AA)的研究对象患NAFLD的风险分别小于rs2075672 GG基因型或rs1052897 TT基因型携带者，0Rs分别为0.31(0.12,0.77)和0.32(0.11,0.98)。按年龄分层分析结果显示，年龄≥60周岁的人群中，携带rs4434553突变基因型(GA+GG)或rs2075672突变基因型(GA+AA)的研究对象患NAFLD的风险分别小于rs4434553 AA基因型和rs2075672 GG基因型携带者，0Rs分别为0.17(0.04，0.69)和0.32(0.11,0.91)。结合上述三个SNPs位点计算每个研究对象的遗传风险评分(genetic risk score,GRS)，结果提示随着危险等位基因数目的增加，NAFLD的危险性呈现增高的趋势，呈剂量反应关系(P趋势=0.048)。
　　结论:
　　1．膳食血红素铁摄入增高可能是NAFLD的危险因素，NAFLD患者应注意控制铁的摄入量，尤其是富含血红素铁的食品。
　　2．血清SF水平增高是NAFLD的危险因素，而sTFR2/SF、hepcidin/SF比值增大可能有助于降低NAFLD发病风险。
　　3．TFR2基因多态性可能与NAFLD遗传易感性相关。其中携带rs4434553 GA或GG基因型、rs1052897 TA或AA基因型、rs2075672 GA或AA基因型可能可以降低NAFLD发病风险。

目录

声明

英文缩略词表

第一部分膳食铁摄入与非酒精性脂肪肝关系的病例对照研究

1 前言

2 研究对象与方法

3 结果

4 讨论

5 小结

第二部分机体铁负荷与非酒精性脂肪性肝病关系的病例对照研究

1 前言

2 材料与方法

3 结果

4 讨论

5 小结

第三部分 TFR2基因多态性与非酒精性脂肪性肝病关系的病例对照研究

1 前言

2 材料与方法

3 结果

4 讨论

5 小结

参考文献

综述:铁超载与非酒精性脂肪肝的研究进展

致谢