重组腺病毒Ad-IL-12感染淋巴细胞对人卵巢癌细胞SKOV3增殖和凋亡的影响

摘要

目的:探讨重组腺病毒Ad-IL-12感染人外周血淋巴细胞后对人卵巢癌细胞SKOV3增殖、周期和凋亡的影响。
　　方法:用重组人IL-12腺病毒(Ad-IL-12)感染人外周血淋巴细胞，感染48 h后与人卵巢癌细胞SKOV3共培养(SKOV3/Ad-IL-12)，同时设未感染组(SKOV3)和Ad-GFP空载感染组(SKOV3/Ad-GFP)作为对照。RT-PCR检测IL-12双亚基P35和P40的mRNA表达，ELISA检测细胞培养上清中IL-12 P70蛋白的分泌，CCK8法检测SKOV3增殖情况，流式细胞术分析共培养后的卵巢癌细胞周期和凋亡水平，进一步以RT-PCR和Western blot检测抗凋亡蛋白BCL-2、Survivin的表达。
　　结果:重组腺病毒Ad-IL-12可成功感染人外周血淋巴细胞，分泌较高水平的IL-12 P70蛋白;淋巴细胞过表达IL-12可抑制SKOV3细胞的增殖;与未感染组和空载组相比，SKOV3/Ad-IL-12组G1期细胞显著增加，凋亡率显著升高（P＜0.05)，SKOV3细胞中的抗凋亡蛋白BCL-2和Survivin也显著下调（P＜0.05)。
　　结论:人IL-12基因重组腺病毒可以有效感染人外周血淋巴细胞，上调IL-12 P70蛋白表达和分泌，并可以通过将SKOV3细胞周期阻滞在G1期和促进其凋亡，抑制人卵巢癌细胞SKOV3的增殖。

目录

声明

符号说明

摘要

前言

第一部分 分离纯化外周血淋巴细胞及高表达IL-12淋巴细胞的建立

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

第二部分 重组腺病毒Ad-IL-12感染淋巴细胞对人卵巢癌细胞SKOV3增殖和凋亡的影响

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

参考文献

全文总结

文献综述 IL-12基因治疗的研究进展

致谢

攻读硕士期间发表的学术论文