生物钟基因Per1、Per2与细胞周期相关基因在口腔颊粘膜癌变不同阶段昼夜节律表达改变的动态研究

摘要

目的：探讨生物钟基因Perl、Per2和细胞周期基因p53、CyclinD1、CDK1、CyclinB1、Wee1在口腔颊粘膜癌变发生、发展不同阶段的昼夜节律表达变化以及与癌变发生的关系。
　　方法：90只叙利亚金黄地鼠饲养于12 h光照和12 h黑暗交替环境中，3周后，用二甲基苯并蒽（DMBA）丙酮溶液涂抹颊粘膜，建立金黄地鼠口腔颊粘膜鳞癌模型，分别在涂抹二甲基苯并蒽丙酮溶液前、第6周和第14周后的24h内，在灯亮后（hour after lights onset, HALO）的4、8、12、16、20和24 HALO6个不同时间点处死金黄地鼠，每个时间点5只，分别获取正常颊粘膜、癌前病变和癌症3个不同阶段昼夜6个不同时间的组织。常规切片在HE染色下观察组织癌变情况；用Real time RT-PCR检测各时间点组织中Perl、Per2、p53、CyclinD1、CDK1和CyclinB1、Wee1 mRNA的表达，采用余弦分析软件，以中值、振幅和峰值位相时为指标，分析各基因的表达在癌变不同阶段的昼夜节律变化特征。
　　结果：Perl、Per2、p53、CDK1和CyclinD1、Wee1 mRNA分别在癌症发生发展3个不同阶段中的表达均具有昼夜节律性（ P<0.05）， CyclinB1 mRNA仅在正常和癌症阶段中的表达具有昼夜节律性（P<0.05），而在癌前病变阶段则表现为昼夜节律紊乱(P>0.05)；Per1、Per2和p53 mRNA表达的中值随着癌症的发展而显著降低（P<0.05）， CyclinD1、CDK1和CyclinB1、Wee1 mRNA表达的中值随着癌症的发展而显著上升（P<0.05）；Per1、Per2、p53和CyclinD1 mRNA表达的振幅随着癌症的发展显著降低（P<0.05），CDK1、Wee1mRNA的振幅随着癌症的发展显著增加（P<0.05），而CyclinB1 mRNA的振幅无显著性改变(P>0.05)；在癌前病变阶段Per1、Per2和 CDK1、Wee1 mRNA峰值出现时间（即峰值位相时）较正常阶段明显提前，而p53和CyclinD1 mRNA峰值表现为明显滞后；在癌症阶段CDK1和CyclinB1、Wee1 mRNA的峰值位相时较正常阶段明显滞后，而Per1、Per2、p53和CyclinD1 mRNA无明显变化。
　　结论：随着癌症的发生和发展，生物钟基因 Per1、Per2和细胞周期基因 p53、CyclinB1、CDK1、CyclinD1、Wee1表达的昼夜节律特征发生明显改变。从昼夜节律和细胞周期这两大周期活动之间的相互作用以及与癌变发生关系进行深入研究，将可能为探索癌症发生发展的机制以及为癌症个体化的治疗提供新的思路和方法。

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封面

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英汉缩略语名词对照

中文摘要

英文摘要

前言

1 材料与方法

1.1 主要材料

1.2 实验方法

1.3 统计学分析

2 实验结果

2.1 DMBA诱导金黄地鼠口腔颊粘膜癌变的动物模型相关结果

2.2 钟基因Per1和 Per2的mRNA在颊粘膜癌变不同阶段的表达和昼夜节律改变

2.3 细胞周期相关基因的mRNA在颊粘膜癌变不同阶段的表达及昼夜节律改变

3 讨论

参考文献

全文总结

附图

文献综述: 昼夜节律钟基因与细胞周期基因相互调控的研究进展

致谢

硕士研究生期间发表的论文