机械压力敏感性通道蛋白表达水平与COPD患者气道重塑的关联性分析

摘要

目的：探讨机械压力敏感性瞬时受体电位C1蛋白（TRPC1）在慢性阻塞性肺病患者（COPD）支气管上皮细胞的表达情况，阐述TRRC1蛋白参与COPD气道重塑的分子机制。
　　方法：选择预行纤维支气管镜检查的患者64例作为非手术组，根据COPD诊治指南分为轻至中度COPD患者（COPD组）40例和无气道慢性炎症性疾病患者（对照组）24例。分别检测第1秒用力呼气容积/用力肺活量（FEV1/FVC)和实测值占预测值百分比（FEV1％pred）；在纤维支气管镜引导下得到肺泡灌洗液(BALF)，采用ELISA法测定BALF中TRPC1、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、转化生长因子-β1（TGF-β1）的表达水平。分析BALF中TRPC1表达量与FEV1%pred、FEV1/FVC水平、MMP-9及TGF-β1表达水平的相关性。选取行肺叶切除术患者的肺组织标本17例作为手术组，其中COPD组8例及对照组（无慢性气道炎症性疾病）9例。高分辨 CT下测量同一部位支气管重塑指标，测定壁厚与外径比率（TDR%）、气道壁面积占总横截面积比（WA%）对比气道结构变化。免疫组织化学法明确TRPC1蛋白在人支气管上皮层的分布特点，用Imagepro-plus6.0软件比较COPD组与对照组气道上皮细胞中TRPC1蛋白的表达差异，Western blotting法测定TRPC1表达水平。分析气道支气管上皮细胞中TRPC1表达水平与TDR%、WA%的相关性。
　　结果：非手术组患者肺功能，与对照组比较，COPD组患者FEV1%pred和FEV1/FVC均下降(P＜0.05)，TRPC1、MMP-9和TGF-β1表达水平升高(P＜0.05)。偏相关分析，COPD组TRPC1表达水平与FEV1%pred(r=-0.34，P=0.002)和FEV1/FVC(r=-0.38，P=0.004)呈负相关关系，与MMP-9(r=0.36，P=0.004)和TGF-β1(r=0.61，P=0.002)表达量呈正相关。手术组组织标本中TRPC1蛋白主要分布于支气管上皮细胞腔内侧，表达于柱状细胞或杯状细胞胞浆内；其中COPD组累积光密度(IOD)/面积(area)比值高于对照组(P＜0.05)；Western boltting法检测，COPD组支气管黏膜上皮内TRPC1蛋白表达水平高于对照组(P＜0.05)。偏相关分析，COPD组TRPC1表达水平与TDR%(r=0.59，P=0.002)和WA%(r=0.60,P=0.002)呈正相关关系。
　　结论：COPD患者支气管粘膜上皮细胞中TRPC1呈高水平表达，并与肺功能受损程度、气道重塑相关因子表达水平呈正相关关系，说明感知压力的TRPC1通道可促进COPD的发生发展。