新型无标记且可重复使用的电化学细胞传感器的研究及其高灵敏检测和特异性收集循环肿瘤细胞

摘要

目的:
　　癌症是全球死亡率最高的疾病，其引起死亡的主要原因是肿瘤细胞的侵袭及转移，所以对肿瘤转移的早期监测具有重要的临床价值。血液中的循环肿瘤细胞包含大量的肿瘤表型信息，是肿瘤转移的重要标志物。因此，高灵敏的检测与高特异的收集循环肿瘤细胞对癌症转移的早期监测以及分子机制的研究是十分有意义的。
　　方法:
　　基于电化学阻抗谱法设计一种新型无标记的电化学细胞传感器用于循环肿瘤细胞的检测。首先，将6-巯基-1-乙醇（MCH）固定在金电极表面，使捕获探针定向插入 MCH分子所形成的间隙中，可促进捕获探针站立且更加均匀地分布在电极表面，进而提高细胞传感器的灵敏度与稳定性。利用高亲和力的适体特异地识别肿瘤细胞膜上过表达的上皮细胞粘附分子捕获靶细胞以提高检测特异性。由于细胞具有很强的阻碍电子转移特性，因此我们选择电化学阻抗谱法对其进行检测。检测后，借助脱氧尿嘧啶水解酶水解适体与捕获探针结合部分的脱氧尿苷实现电极的重复利用以及循环肿瘤细胞的收集。
　　结果:
　　此传感器具有良好稳定性和可重复性，检测范围可达到30-1×106 cells/mL，检测限可低至10cells/mL。并且该细胞传感器凭借上皮细胞黏附分子与相应适体的特异性结合可精准的在实际血液样本中区分出靶细胞。此细胞传感器还可通过脱氧尿嘧啶水解酶特异性切除适体与捕获探针结合部分的脱氧尿苷，成功地实现电极的8次重复利用及循环肿瘤细胞的富集。
　　结论:
　　综上所述，我们设计的细胞传感器有很大的潜力可以应用于临床，可望对癌症的转移进行早期监测。

目录

声明

英汉缩略语名词对照

前言

1实验部分

1.1实验技术路线

1.2试剂与仪器

1.3金电极的准备

1.4细胞传感器的制备

1.5电化学检测和细胞传感器的再生

1.6细胞培养和收集

1.7免疫荧光染色

2.结果与讨论

2.1细胞传感器的表征

2.2实验参数的优化

2.3细胞传感器的灵敏度和选择性

2.4重现性和细胞传感器的稳定性

2.5血液标本肿瘤细胞的检测

2.6细胞传感器的重复利用

2.7循环肿瘤细胞的收集和培养

全文总结

参考文献

文献综述:电化学细胞传感器放大策略的研究进展

致谢

攻读学位期间的科研成果和发表的学术论文