焦虑模型大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴高反应性与皮质类固醇受体关系的研究

摘要

目的：
　　研究在应激条件下焦虑模型大鼠下丘脑-垂体-肾上腺（hypothalamus-pituitary-adrenal,HPA）轴呈高反应性是与轴本身功能亢进还是与皮质类固醇受体改变相关。
　　方法：
　　将SD健康雄性大鼠随机分为两组，对照组（n=20）和模型组(n=26)。采用不可预知的情绪应激方法建立大鼠焦虑模型，对照组给予正常饲养。每周称量所有大鼠的体重，并在造模结束后，通过行为学实验检测造模是否成功。高架十字迷宫和旷场作为应激源刺激大鼠，测定两组大鼠血清中大鼠促肾上腺皮质激素（ACTH）和皮质酮（CORT）水平。用实时荧光定量PCR技术检测两组大鼠海马组织中盐皮质激素受体（mineralocorticoid steroid receptor,MR）和糖皮质激素受体（glucocorticoid steroid receptor,GR）mRNA水平及GR在下丘脑、垂体和肾上腺组织中的mRNA表达水平。蛋白免疫印迹（Western blot）检测两组大鼠海马组织内MR和GR蛋白水平以及GR在下丘脑、垂体和肾上腺组织中的蛋白表达水平。
　　结果：
　　（1）与对照组相比，焦虑模型大鼠体重增长率显著降低（P＜0.01）。
　　（2）高架十字迷宫和旷场实验结果表明，与对照组相比，模型组大鼠进入开放臂的次数（OE）、开放臂停留的时间（OT）、进入开放臂的次数百分比（OE%）和进入开放臂的时间百分比（OT%）均显著降低（P＜0.01）；模型组大鼠运动的总路程、中央活动路程百分比和中央活动时间百分比均显著降低（P＜0.01，P＜0.05）。
　　（3）在基础条件下，两组大鼠分泌的促肾上腺皮质激素和皮质酮无明显差异（P＞0.05）；而在应激条件下，模型组大鼠分泌的两种激素增加显著高于对照组（P＜0.01）。
　　（4）与对照组相比，模型组MR mRNA在大鼠海马组织中表达无明显差异（P＞0.05）；而模型组大鼠GR在海马、下丘脑、垂体和肾上腺组织中的mRNA表达水平均显著降低（P＜0.01，P＜0.05）。
　　（5）与对照组比较，模型组MR蛋白表达在大鼠海马组织中无明显差异（P＞0.05）；GR蛋白表达在大鼠海马、下丘脑和肾上腺组织中均显著降低（P＜0.01，P＜0.05），而在垂体中表达无差异（P＞0.05）。
　　结论：
　　在应激条件下，焦虑模型大鼠 HPA轴呈高反应性与 GR介导的轴负反馈调节作用改变相关。

目录

声明

英汉缩略语名词对照

前言

1材料

1.1实验动物

1.2主要试剂

1.3主要仪器

2方法与步骤

2.1焦虑模型

2.2行为学检测

2.3血清ACTH和CORT浓度测定

2.4实时荧光定量PCR（RT-PCR）

2.5蛋白免疫印迹（Western blotting）

2.6统计学分析

3结果

3.1行为学检测

3.2高架十字迷宫实验

3.3血清ACTH和CORT浓度测定

3.4 RT-PCR结果

3.5 Western blot结果

4结论

5讨论

全文总结

参考文献

文献综述:焦虑障碍与HPA轴功能改变相关的研究进展

致谢

攻读硕士期间参与发表的学术论文