核苷（酸）类似物治疗获得HBV-DNA<1000 IU/ml、HBeAg消失、HBsAg<3000 IU/ml的慢性乙型病毒性肝炎患者获得性细胞免疫的研究

摘要

目的：
　　通过检测慢性乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）感染者外周不同亚型CD4+、CD8+T细胞频数及其表面分子，探讨核苷（酸）类似物（nucleot（s）ide analogue，NA）治疗获得HBV-DNA＜1000IU/ml、HBeAg消失、HBsAg＜3000IU/ml的慢性乙型病毒性肝炎（Chronic hepatitis B,CHB）患者获得性细胞免疫功能重建情况；同时与病毒学指标相同的低复制期患者相比是否存在差异；并探讨慢乙肝治疗组患者获得性细胞免疫与HBsAg滴度的关系。
　　方法：
　　l4例CHB活动期患者: HBV-DNA＞2000IU/ml，HBsAg阳性＞6个月，血清转氨酶异常,且ALT＞2倍正常值；30例接受NA治疗的CHB患者:0.05IU/ml＜HBsAg<3000IU/ml，HBV-DNA＜1000IU/ml或低于检出限，HBeAg阴性；20例低复制期CHB患者:0.05IU/ml＜HBsAg<3000IU/ml，HBV-DNA＜1000IU/ml或低于检出限，HBeAg阴性；13位健康志愿者。采集患者及健康志愿者外周血，用流式细胞技术检测各组外周血中CD4+/CD8+初始T细胞（TN）、中枢记忆性T细胞（TCM）、效应记忆性T细胞（TEM）、效应T细胞（TE）,辅助性T细胞1（TH1）、辅助性T细胞2（TH2）、辅助性T细胞（TH17）、调节性T细胞（Treg）频数，并检测CD4+、CD8+T细胞表面分子Tim3、PD1、CTLA4的表达水平。
　　结果：
　　（1）与健康对照组相比，慢乙肝治疗组患者CD4+TCM细胞频数升高，而CD4+TE细胞降低。CD8+T细胞各亚型频数在各组间无明显区别。
　　（2）TH1、TH2细胞频数在各组间无明显区别，慢乙肝治疗组TH17细胞频数低于慢乙肝活动组，高于健康对照组，与低复制组无明显区别。慢乙肝治疗组CD4+CD25+CD127dimTreg细胞频数介于慢乙肝活动组与健康对照组之间，与低复制期组无明显区别。慢乙肝治疗组CD25hiTreg细胞CCR4表达高于健康对照组，与慢乙肝活动组、低复制期组之间无明显区别。
　　（3）TH1/TH2比率在各组间无明显区别；Treg/TH17比率慢乙肝治疗组、慢乙肝活动组低于健康对照组，慢乙肝治疗组与低复制期组之间无明显差异。
　　（4）慢乙肝治疗组CD4+/CD8+T细胞上PD-1表达在各组间无明显差异；慢乙肝治疗组CD4+/CD8+T细胞上CTLA4表达与慢乙肝活动组无明显区别，但明显高于健康对照组，稍高于低复制期组。慢乙肝治疗组CD4+T细胞Tim3表达高于低复制期组。
　　（5）慢乙肝治疗组患者血清HBsAg滴度与CD4+CD25+Treg细胞频数呈正相关，与CD4+/CD8+T细胞上的Tim3表达呈正相关，与CD8+T细胞上的PD-1表达呈负相关。
　　结论：
　　慢乙肝患者NA治疗后获得性细胞免疫功能并未发生明显变化；慢乙肝治疗组总的CD4+、CD8+T细胞功能低于低复制期组；慢乙肝治疗组患者血清HBsAg滴度水平与Treg细胞频数、T细胞上抑制性分子相关。慢乙肝患者NA治疗获得HBV-DNA＜1000IU/ml、HBeAg消失、HBsAg＜3000IU/ml后，并不能使获得性细胞免疫功能恢复。

目录

声明

英汉缩略语名词对照

前言

1 材料

1.1标本来源及分组

1.2主要抗体

1.3主要试剂

1.4主要仪器

1.5主要试剂配制

2方法

2.1外周血标本采集

2.2临床指标检测

2.3流式细胞术检测各组外周血中CD4+/CD8+TN、TCM、TEM、TE, TH1、TH2、TH17、Treg细胞频数，并检测CD4+、CD8+T细胞表面分子Tim3、PD1、CTLA4的表达情况。

2.4统计学分析

3结果

3.1患者的临床资料分析

3.2 CD4+和CD8+TN、TCM、TEM、TE细胞频数在各组间比较

3.3 TH细胞频数在各组间比较

3.4各亚型Treg细胞频数及TH1/TH2、Treg/TH17比率在各组间的比较

3.5 CTLA4、PD-1、Tim3在CD4+、CD8+T细胞表达在各组间的比较

3.6 CD4+、CD8+T细胞表面分子及各亚型细胞频数与血清HBsAg滴度相关性分析

4讨论

全文总结

参考文献

文献综述:T细胞表面分子PD-1、CTLA4、Tim3与慢性HBV感染的研究进展

致谢

攻读硕士学位期间发表的论文