5-Fu温热化疗对人胃癌细胞株SGC-7901的促细胞凋亡作用及凋亡相关基因表达的影响

摘要

胃癌是我国最常见、多发的腹腔恶性肿瘤，居恶性肿瘤死亡率的第二位，早期难以发现，多数病人在就诊时已为进展期，患者生活质量及预后很差。化疗在胃癌的治疗中占有重要地位，其中5-FU及其同类的化疗药物在胃癌的治疗上发挥着重要作用，是主要的、有效的化疗药物，5-FU是剂量依赖性药物，剂量越大疗效越好，但是，总体疗效有限。随着肿瘤热生物学研究和技术的发展，热疗己成为继手术、化疗、放疗及免疫治疗之后的第五种恶性肿瘤治疗方法，但单独应用热疗，效果有限。近年来，腹腔内热灌注化疗在胃癌治疗中的应用越来越广泛，并取得了独特的临床疗效，研究表明，热疗与化疗具有抗肿瘤协同作用，但目前对发挥温热化疗最佳效果的温度尚不清楚，对温热化疗抗肿瘤协同作用的机制更缺乏了解。
　　 目的：
　　 本实验旨在细胞水平上研究发挥温热化疗最佳效果的温度，在基因水平上探讨温热化疗抗肿瘤协同作用的机制，为临床合理联合应用热化疗提供实验依据。
　　 材料和方法：
　　 应用细胞培养技术培养人胃癌SGC-7901细胞；显微镜观察温热化疗对细胞形态的影响；以FCM检测热疗、化疗、温热化疗对肿瘤细胞的促凋亡作用；以人细胞凋亡基因芯片筛选出温热化疗作用后差异表达显著的基因。
　　 结果：
　　 1、显微镜观察表明，单纯温热和温热化疗协同均有一定的促细胞凋亡作用，而热化疗组出现大量的凋亡细胞；
　　 2、5-FU对SGC-7901细胞的促凋亡作用，具有较强的温度依赖关系，随着温度的增加，细胞的促凋亡作用逐渐增强，其作用在43℃～45℃温度区间内随温度升高而加强，与单纯温热组和单纯化疗组相比，差异具有显著性(P<0.05)；而在40℃～42℃温度区间，差异没有显著性；
　　 3、根据Veleriote法判定温热联合化疗在41℃～45℃区间呈现协同作用；
　　 4、基因芯片检测发现，温热化疗作用后比较热疗和化疗有5个基因表达显著上调，包括：Fas-L、Bax、Caspase 3、Caspase 9、Apaf-1；2个基因下调，包括：Bcl-2、Bag-1。
　　 结论：
　　 1.温热可提高人胃癌SGC-7901细胞株的化疗敏感性，在40℃～43℃区间具有热化疗增敏作用，在较高的处理温度43℃～45℃区间具有明显的热化疗协同作用。
　　 2．热疗和化疗发挥抗肿瘤协同作用的最佳温度为43℃。
　　 3.温热化疗增敏可能通过上调Fas-L、Bax、Caspase 3、Caspase 9、Apaf-1，下调Bcl-2、Bag-1诱导人胃癌细胞株SGC-7901凋亡，这可能是包括死亡受体途径和线粒体途径在内的多条通路共同作用的结果。