脂联素基因多态性与广东省普通人群非酒精性脂肪性肝病发病及自然病程相关性研究

摘要

背景：
　　非酒精性脂肪性肝病（Non-alcoholic fatty liver disease，NAFLD）是一种与遗传易感性及代谢综合征(Metabolism syndrome,MetS)密切相关的代谢应激性肝脏损害，其疾病谱包括非酒精性单纯性脂肪肝（Simple nonalcoholic fatty liver,NAFL）、非酒精性脂肪性肝炎（Nonalcoholic steatohepatitis,NASH）及其相关肝硬化和肝细胞癌。脂联素(adiponectin,ADIPOQ)由脂肪组织表达和分泌，具有保护肝细胞、促进脂肪酸氧化，调节胰岛素敏感性等作用，是调节脂质代谢和糖代谢的重要因子，可能与NAFLD的发生及病变进展密切相关。在脂联素基因多态性与NAFLD的相关研究中，目前的研究思路多为选择单个多态性位点与 NAFLD发病易感性的横断面或病例对照研究，且国内外尚无NAFLD自然病程与脂联素基因多态性关系的纵向研究。NAFLD作为一种与MetS密切相关的复杂疾病，可能受多个位点共同突变的影响，目前对于脂联素基因多态性单个位点的研究可能会导致研究结论出现偏差。因此，我们在前期横段面研究的基础上，进一步纵向追踪这队列人群4年，利用HapMap数据库通过选择标签(tag single nucleotide polymorphism，tagSNP)的方法，研究汉族人群脂联素基因7个tagSNP，全面覆盖整个脂联素基因所有常见多态性位点，同时探讨整个脂联素基因多态性对NAFLD的发病及自然病程的影响。
　　目的：
　　本研究在前期横断面调查的基础上，进一步纵向追踪这队列人群4年，并利用HapMap数据库通过选择tagSNP的方法，对汉族人群脂联素基因7个tagSNP进行研究，同时探讨脂联素基因多态性与NAFLD发病易感性及自然病程的相关性。
　　方法：
　　在2005年6月至9月（基线）对广东省3543例普通人群进行NAFLD流行病学调查的基础上，2009年6月至9月（终点）我们用同样方法回访这队列人群。去除因涉及饮酒、病毒性肝炎、药物性肝病等原因的样本，把回访的696例样本全部纳入自然病程追踪研究，其中筛选出两次调查均为NAFLD的119例患者为NAFLD组，两次调查均正常的350例为对照组进行发病易感性研究。利用HapMap数据库选择了7个tagSNP，应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术（Polymerase chain reaction-Restriction fragment length polymorphism PCR-RFLP）检测脂联素基因7个tagSNP：rs182052、rs16861205、rs822396、rs7627128、rs1501299、rs2241767、rs3774261的基因型，分析其与 NAFLD发病易感性及自然病程的相关性。
　　结果：
　　1.发病易感性研究结果：
　　(1)两组临床资料比较，病例组体重指数、腰围、臀围、腰臀比、收缩压、舒张压、空腹血糖、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白、空腹胰岛素均显著高于对照组（P<0.05），而高密度脂蛋白显著低于对照组（P<0.05）。
　　(2)危险因素的logistic回归分析显示，rs1501299的TT基因型是NAFLD患病的危险因素（OR=5.040，95％CI：1.919-13.236，P=0.001），rs2241767的GG基因型是NAFLD患病的危险因素（OR=7.471，95%CI：2.836-19.684，P＜0.001），rs3774261的GG基因型是NAFLD患病的危险因素（OR=3.546，95%CI：1.402-8.972，P=0.008），余位点与NAFLD发病易感性不相关。
　　(3) rs2241767-rs1501299-rs3774261单体型分析显示，ATA单体型是NAFLD的保护因素（OR=0.144,95%CI：0.037-0.558，P=0.001），GGA单体型是NAFLD的危险因素（OR=12.086,95%CI：2.422-60.302，P＜0.001）,GTG单体型是NAFLD的危险因素（OR=15.355,95%CI：3.946-59.748，P＜0.001）。
　　2.自然病程研究结果：
　　(1)多态性位点不同基因型间临床资料的比较，rs16861205G/T等位基因在WHR、HDL均值存在差异，GG/AG/AA基因型WHR均值分别为0.85±0.09、0.83±0.07、0.83±0.08(P=0.02)，HDL均值分别为1.45±0.42、1.53±0.47、1.68±0.44（P=0.02）。rs182052A/G等位基因FPG存在差异，GG/AG/AA基因型均值为6.31±2.31/5.93±1.95/5.88±1.81(p=0.02)。
　　(2)危险因素的有序logistic回归分析显示，rs1501299、rs2241767、rs377426多态性对NAFLD自然病程有影响。在rs1501299位点，与TT型相比，GT基因型使NAFLD病情加重的风险降低为43%,(p=0.011，OR=0.43),GG基因型使NAFLD病情加重的风险降低为22%,(p＜0.001，OR=0.22);在rs2241767位点，与GG基因型相比，AG基因型使NAFLD病情加重的风险降低为42%(p=0.004，OR=0.42)，AA基因型使NAFLD病情加重的风险降低为20%(p＜0.001，OR=0.20)。在rs3774261位点，与GG基因型相比，AG基因型使NAFLD病情加重的风险降低为55%(p=0.026，OR=0.55)，AA基因型使NAFLD病情加重的风险降低为28%(p=0.001，OR=0.28).余位点与NAFLD的自然病程不相关。
　　结论：
　　脂联素基因rs1501299、rs2241767、rs3774261多态性与NAFLD发病易感性和自然病程相关。

目录

封面

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中英文对照缩略词表

中文摘要

英文摘要

前 言

1.NAFLD的概述

2.NAFLD的发病机制

3.脂联素对肝脏的保护作用

4.NAFLD与基因多态性

材料和方法

1 研究对象

2 NAFLD的诊断及研究对象的分组标准

3 主要试剂盒及配液

4 主要使用的软件

5 实验方法

6 统计方法

结 果

(1)发病易感性分析结果：

(2)自然病程分析结果：

讨论

结论

附图（1-7）

参考文献

综 述

致谢

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