肿瘤抑制基因maspin在妊娠滋养细胞疾病中表达的初步研究

摘要

目的: 检测妊娠滋养细胞疾病(GTD)中肿瘤抑制基因maspin的表达，探讨maspin基因在GTD发病机制中的作用，为预测良性滋养细胞疾病恶变及恶变的早期诊断寻找有效生物学指标，及其与转化生长因子β1(TGFβ1)表达的相关性。 方法: 采用免疫组织化学S-P法，检测20例正常早孕绒毛组织(6-9W)，48例葡萄胎(包括完全性葡萄胎30例，部分性葡萄胎18例)，其中进展为妊娠滋养细胞肿瘤(GTN)者l0例，18例侵蚀性葡萄胎，10例绒毛膜癌组织中maspin及TGFβ1的表达；逆转录聚合酶链RT-PCR法检测maspin基因在同期标本转录水平表达情况，包括正常早孕绒毛组织20例，葡萄胎组织25例，侵蚀性葡萄胎6例，绒癌5例。 结论: (1)肿瘤抑制基因maspin在妊娠滋养细胞疾病中表达下调，这种下调作用在滋养细胞疾病恶变过程更为显著，提示maspin可能成为早期预测葡萄胎恶变及预防性化疗的有效指标之一。(2)TGFβ1在GTD中表达上调，与maspin表达呈负相关，两者的表达失常，可能促进了滋养细胞侵袭，浸润、远处转移等恶性行为，两者联合测定对预测良性葡萄胎恶变可能有更大的参考价值。(3)maspin的正常表达有赖于启动区结合位点的完整性，在侵蚀性葡萄胎和绒癌中转录水平的缺失，提示可能存在启动区甲基化，致maspin基因沉默；正常早孕绒毛组织中maspin与TGFβ1均有表达，随着滋养细胞肿瘤恶性程度的增加，两者表达呈负相关趋势，可能TGFβ1参与调节maspin基因表达，TGFβ1对maspin的调节及两者在GTD发生发展中的作用机制还有待研究。

目录

声明

摘要

1 前言

1．1研究背景

1．2研究目的

1．3研究内容

2第一部分 免疫组化

2．1材料

2．1．1 标本来源

2．1．2 主要试剂

2．1．3 主要工作液

2．1．4 主要仪器

2．2实验方法

2．2．1 免疫组化切片制备

2．2．2 组织标本的石蜡包埋处理

2．2．3 免疫组化SP法染色步骤

2．2．4 免疫组化结果的判定

2．2．5 统计学分析

2．3结果

2．3．1 Maspin蛋白在正常早孕绒毛及滋养细胞疾病中的表达

2．3．2 TGF β 1在正常早孕绒毛及滋养细胞疾病中的表达

2．3．3 Maspin、TGF β 1在葡萄胎恶变组与无恶变组中的表达

2．3．4 葡萄胎中maspin、TGF β 1表达与滋养细胞增生程度的关系

2．3．5 滋养细胞肿瘤中maspin、TGF β 1表达与临床病理参数的关系

3 第二部分RT-PCR法检测maspin基因在GTD中的表达

3．1材料

3．1．1 标本来源

3．1．2 试剂

3．1.3 主要工作液

3．1．4 主要仪器

3．2实验方法

3．2．1 实验器具的处理与准备

3．2．2 实验步骤

3．2．3 统计学分析

3．3结果

4讨论

4．1 Maspin基因的结构与作用机制

4．2 Maspin在滋养细胞疾病发生、发展中的作用

4．3 Maspin在滋养细胞疾病中与TGF β l表达的相关性

5小结

参考文献

附图

文献综述 肿瘤抑制基因maspin与妇科肿瘤

致谢

附录