高效液相色谱柱前衍生测定及研究几种氨基糖苷类抗生素的药代动力学

摘要

高效液相色谱法是在经典液相色谱法和气相色谱法基础之上发展起来的新型分离分析技术。由于其简便、快速、灵敏、准确的特点，至今，已经在生物工程、制药工业、食品工业、环境监测、石油化工等领域获得很广泛的应用。
　　 本文建立了用反相高效液相色谱法测定几种氨基糖苷类抗生素在大鼠血浆中含量及药代动力学的方法，由综述和研究报告两部分组成，综述部分简单概述了高效液相色谱的特点、色谱技术方面的进展以及在药物分析中的应用。研究报告部分建立了血浆中奈替米星、阿米卡星、异帕米星几种氨基糖苷类抗生素的测定以及研究了这几种药物在休内的动力学的新方法，包括：柱前衍生反相高效液相色谱荧光法研究奈替米星、阿米卡星、异帕米星几种氨基糖苷类抗生素在大鼠体内的动力学。
　　 第一章：绪论部分从高效液相色谱的特点、色谱技术方面的进展以及在氨基类抗生素在HPLC分析技术的研究进展与应用现状。
　　 第二章：建立了一种简便、灵敏的氯甲酸芴甲酯(FMOC-C1)柱前衍生反相高效液相色谱荧光检测血浆中奈替米星的新方法，同时研究了其药代动力学。对色谱条件进行了优化，采用ZORBAX Eclipse XDB-C8(150 mm×4.6 mm，5 μm)柱，流动相为乙腈-水(85∶15)，流速1.0 mL·min-1，荧光检测波长分别位于Ex=265 nm和Em=315 nm，回收率为96.62-100.84％(n=3)，对奈替米星检测的线性范围为0.045-8.88 μg·mL-1，相关系数为0.9993，方法的日内与日间精密度分别低于2.19％与3.27％，最低检出限(S/N=3，进样量为20μL)与定量限(S/N=10)分别为0.01和0.03μg·mL-1。30 μL奈替米星血浆溶液已满足该药含量的测定以及药物代谢的研究。方法简便、快速、灵敏，为大鼠体内血样动力学的研究提供了可靠的生物分析手段。
　　 第三章：建立了大鼠血浆中的阿米卡星的氯甲酸芴甲酯(FMOC-C1)柱前衍生反相高效液相色谱荧光检测分析法，并用于测定静脉给药后大鼠血浆中浓度的动态变化及药动学参数。对色谱条件进行了优化，采用ZORBAX Eclipse XDB-C8(150 mm×4.6 mm，5 μm)柱，流动相为乙腈-水(68∶32)，流速1.0 mL·min-1，荧光检测波长分别位于Ex=265 nm和Em=315 nm，异帕米星做内标，方法的线性范围为0.045-8.88μL·mL-1(r=0.9993)，日内与日间精密度分别低于2.19％与3.27％，最低检出限(S/N=3，进样量为20μL)与定量限(S/N=10)分别为0.01和0.03μg·mL-1，回收率为96.62-100.84％(n=3)。50μL阿米卡星血浆溶液已满足它含量的测定以及药物代谢的研究。本方法简便、快速、灵敏，可以定量检测大鼠静脉注射后阿米卡星在血中的浓度并提供了可靠的生物分析方法。
　　 第四章：建立一种简便、灵敏的氯甲酸芴甲酯(FMOC-C1)柱前衍生荧光检测反相高效液相色谱法测定血浆中异帕米星的方法，阿米卡星为内标。采用ZORBAX Eclipse XDB-C18柱，流动相为乙腈-水(68∶32)。系统研究了pH值、反应时间及衍生化试剂用量对衍生反应的影响，确定最佳反应条件。血浆中异帕米星的线性范围为0.625-15μg·mL-1；检测限(S/N=3，进样量20μL)为0.10μg·mL-1。日内与日间精确度均小于5％。实验结果表明该方法选择性好，灵敏度高，准确度和精密度都较好。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一章绪论

1高效液相色谱概述

2高效液相色谱及其联用技术在药物分析各领域中的应用进展

2.1在天然药物分析中的应用

2.2抗生素类药物分析中的应用

2.3高效液相色谱在药物残留检测中的应用

2.4高效液相色谱在药代动力学方面的应用

2.5高效液相色谱在毒物分析中的应用

3氨基糖昔类抗生素的发展和研究概况

3.1氨基糖普类抗生素的发展概况

3.2氨基糖昔类抗生素的药动学特点

4药物代谢与药物动力学在新药研究与开发中的应用

5展望

参考文献

第二章柱前衍生反相高效液相色谱-荧光检测法测定大鼠血浆中的奈替米星

1前言

2实验部分

2.1仪器与色谱条件

2.2化学药品与试剂

2.3标准溶液的制备

2.4样品溶液的制备和衍生化过程

2.5标准曲线的制备

2.6方法的应用

3结果和讨论

3.1方法的特异性和选择性

3.2衍生条件的优化

3.3标准曲线及检出限

3.4回收率、重现性及稳定性

3.5奈替米星的血药动力学

4结论

第三章高效液相色谱柱前衍生法测定大鼠血浆中的阿米卡星及药代动力学研究

1前言

2实验部分

2.1仪器与色谱条件

2.2化学药品与试剂

2.3样品处理方法

3结果与讨论

3.1衍生条件的优化

3.2阿米卡星的色谱分离

3.3.标准曲线及检出限

3.4回收率、重现性及稳定性实验

4血药动力学

5结论

第四章柱前衍生高效液相色谱荧光法测定大鼠血浆中的异帕米星

1前言

2实验部分

2.1仪器与色谱条件

2.2化学药品与试剂

2.3标准溶液的制备

2.4样品溶液的制备和衍生化过程

2.5标准曲线的制备

2.6方法的应用

3结果和讨论

3.1方法的特异性和选择性

3.2衍生条件的优化

3.3标准曲线及检出限

3.4回收率、重现性及稳定性

3.5异帕米星的血药动力学

4结论

参考文献

附录：硕士期间发表的论文题

致谢