声明
第一章 文献综述
1.1 微孢子虫基本特征
1.1.1 微孢子虫的结构
1.1.2 微孢子虫的侵染机制
1.1.3 微孢子虫的生活史
1.2 微孢子虫的分泌蛋白
1.3 诱导型基因编辑系统研究进展
1.3.1 CRISPR/Cas9基因编辑系统概述
1.3.2 基因编辑在寄生虫防控中研究进展
1.3.3 诱导型基因编辑系统的的研究
第二章 引言
2.1 研究背景与目的意义
2.2 主要研究内容
2.3 技术路线
第三章 家蚕微粒子分泌蛋白相关基因的筛选
3.1 材料与方法
3.1.1 实验材料
3.1.2 实验试剂及溶液配制
3.1.3 主要仪器
3.1.4 实验方法与步骤
3.2结果与分析
3.2.1 靶基因筛选和NB29的基本序列特征分析
3.2.2 家蚕微粒子NB29的二级结构分析
3.2.3 NB29及其截短突变体的亚细胞定位分析
3.3讨论
第四章 家蚕微粒子NB29蛋白的特征鉴定
4.1 材料与方法
4.1.1 实验材料
4.1.2 实验试剂及溶液的配制
4.1.3 主要实验仪器
4.1.4 实验方法与步骤
4.2结果与分析
4.2.1 酵母信号肽诱捕系统验证NB29蛋白分泌性
4.2.2 TTC实验验证NB29蛋白分泌性
4.2.3 荧光共定位分析NB29-B的定位情况
4.2.4 BiFC和免疫共沉淀分析NB29-B自身的相互作用
4.3讨论
第五章 基于家蚕微粒子NB29蛋白的Cas9系统构建
5.1 材料与方法
5.1.1 实验材料
5.1.2 试剂及溶液配制
5.1.3 主要仪器
5.1.4 实验方法与步骤
5.2 结果与分析
5.2.1 NB29信号肽及核定位信号截短分析
5.2.2 最优截短体NB29-N3与NB29-B互作分析
5.2.3 截短突变体NB29-N3对家蚕细胞增殖活力的影响
5.2.4 Cas9蛋白入核分析
5.2.5 外源egfp基因的CPISPR-Cas9敲除效果检测
5.3 讨论
第六章 家蚕微粒子诱导型Cas9系统的初步应用
6.1 材料与方法
6.1.1 实验材料
6.1.2 试剂及溶液配制
6.1.3 主要仪器
6.1.4 实验方法及步骤
6.2 结果与分析
6.2.1利用免疫共沉淀技术鉴定NB29的宿主相互作用蛋白
6.2.2 家蚕BmRpn3的克隆及定位
6.2.3 验证BmRpn3的宿主互作蛋白
6.2.4 敲除BmRpn3对家蚕微粒子增殖的影响
6.3讨论
第七章 结论与展望
7.1 结论
7.2 展望
论文创新点
参考文献
在读期间发表论文及参研课题情况
致谢
西南大学;
