波形蛋白在胶质瘢痕形成中的作用——利用反义及正义波形蛋白逆转录病毒的研究

摘要

多种刺激或损伤作用于成年哺乳动物中枢神经系统(central nervoussystem),导致一系列复杂的细胞和分子事件,这些事件表明机体试图修复脑或脊髓的损伤区域.星形胶质细胞是反应性胶质化涉及的最主要细胞.成年CNS的不同部位损伤发现,损伤后的一定时间和范围内,反应性星形胶质细胞不仅增强表达中间丝胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP),而且另一种只主要表达于发育期的中间丝波形蛋白(vimentin,Vim)重新表达,提示Vim在胶质瘢痕的形成中可能有重要作用,两种中间丝之间可能存在一定的联系.我们利用成年大鼠脑刺伤模型,较全面描述了Vim的表达.在此基础上,研究了Ast可分泌的睫状神经营养因子(ciliary neurotrophic factor,CNTF)对反应性胶质化的影响;再利用重组Vim反义和正义逆转录病毒,通过离体和在体研究,进一步阐明Vim在胶质瘢痕形成中的作用及其与GFAP表达的关系.结果表明,在成年大鼠脑损伤后Vim在核酸—RNA、免疫组织化学—蛋白、流式细胞仪记数—细胞水平均增加,伴随胶质化及胶质瘢痕形成的全过程.反应性胶质细胞能够分泌的CNTF促进胶质瘢痕的形成.给予反义Vim逆转录病毒不仅大大减轻了胶质瘢痕中的Vim表达,还在一定程度上阻碍了GFAP的表达,提示Vim在胶质瘢痕形成中的重要作用,运用重组反义Vim逆转录病毒,有望影响胶质瘢痕的程度或过程,从而改善神经元轴突的生长环境,促进CNS功能的恢复.

目录

文摘

英文文摘

常用英文缩写概览

前 言

第一部分大鼠大脑穿刺损伤后波形蛋白及胶质纤维酸性蛋白的表达

参考文献

第二部分重组睫状神经营养因子对胶质瘢痕形成的作用

第一节CNTF对反应性胶质化影响的在体研究

第二节CNTF对反应性胶质化影响的离体研究

参考文献

第三部分反义及正义波形蛋白逆转录病毒对胶质瘢痕形成的影响

第一节反义及正义Vim重组逆转录病毒载体的构建与鉴定

第二节反义及正义Vim重组逆转录病毒对反应性胶质化影响的在体和离体实验研究

参考文献

小 结

照 片

文献综述一波形蛋白与反应性胶质化

文献综述二反应性胶质化中的睫状神经营养因子

致谢

学习期间发表及交流的论文