孕鼠暴露于炎症免疫刺激剂导致仔鼠出生后血压升高、体重增加及机制初步研究

摘要

心血管疾病是当今世界威胁人类健康最严重的疾病之一，其发病率和死亡率已超过肿瘤性疾病而跃居第一。高血压发病率日益增高，成为心血管疾病最主要的危险因素之一。其根本病因至今未明，因而探求病因对高血压的早期预防、及时治疗都有极其重要的意义。近年来对于炎症在心血管疾病过程中发挥了重要作用的相关研究取得了重大的进步，并且越来越多的临床调查证据表明，高血压在某些方面上也与炎症密切相关。有学者通过对妇女健康调查发现高血压发病的危险性同C反应蛋白的水平增高存在正相关性。另有研究证明在高血压病人炎症因子IL-6的水平是升高的，并且血压升高的水平同该细胞因子升高的水平存在一定的关联。更为有趣的是，有研究者发现母鼠在其妊娠期间腹腔注射IL-6，会导致仔鼠出生后血压升高和HPA轴活性的增加。众所周知，IL-6是一个促炎因子，那么，孕鼠注射IL-6可能会引起母体的全身炎症反应。究竟在子代发生的高血压是因为IL-6这个特殊的细胞因子本身所具有的某些特殊作用所引起，还是因为母体的炎症免疫反应所导致的呢?目前没有学者对该方向进行相关报道。基于该设想，我们选取来自革兰氏阴性细菌的脂多糖(lipopolysaccharide，LPs)和来自真菌的酵母多糖(zymosan)作为炎症免疫反应刺激剂，观察孕鼠在妊娠期暴露于该两种刺激剂，其子代大鼠是否在出生后出现高血压，并对其可能的机制进行初步探索。 方法 1．24只通过检查阴栓获得准确妊娠时间的怀孕SD大鼠，随机分为3组，在妊娠8、10、12天，三组孕鼠分别腹腔注射0.79mg/kgLPS、0.79mg/kg酵母多糖和无菌生理盐水。在注射后1小时鼠尾取血用ELISA方法检测血清TNF-α水平。子代大鼠随机选取用于该实验(雄性：对照组，n=12；LPS组，n=12；酵母多糖组，n=12；雌性：对照组，n=12；LPS组，n=12；酵母多糖组，n=12)。 2．幼鼠出生后，从4周龄断奶开始到24周龄，每2周称量体重1次。从6周龄到24周龄，每2周鼠尾无创血压测量技术监测血压1次，每6周监测血糖1次。15周龄时监测食物摄取量1周。24周龄，鼠尾取血分别用ELISA法监测血清中的IL-6、聚乙二醇法测CIC水平，并对仔鼠腹腔注射炎症刺激剂LPSlmg/kg，观察注射前及注射后2h、4h、8h的血清TNF-α水平。在24周龄末断头处死大鼠，取腹腔各部位脂肪测其湿重，取血清放免法测瘦素(Leptin)水平。 结果 1．孕鼠在腹腔注射LPS和zymosan后1h，其血清TNF-α水平较对照组明显升高(P<0.01)，说明在LPS和酵母多糖组，母鼠均发生了炎症免疫反应。 2．对照组、LPS组、zymosan组每只孕鼠生育仔鼠的数量、雌雄比例及胎鼠出生体重，各组之间均没有明显统计学差异(P>0.05)。 3．给予LPS和zymosan腹腔注射的孕鼠，其所生出的无论雄性还是雌性仔鼠，尾动脉收缩压均较同性别对照组仔鼠的收缩压显著升高(P<0.05)，在24周龄时血压达到高血压标准。 4．在LPS、zymosan组，雄性仔鼠体重从6周龄开始，雌性仔鼠体重从14周龄开始，较对照组同性别仔鼠出现显著升高(P<0.05)，脂肪组织重量，食物摄取量较对照组仔鼠非常显著增多(P<0.01)，瘦素水平明显升高(P<0.01)。 5．血清中的血糖水平，LPS组、zymosan组仔鼠同对照组仔鼠无统计学意义差异(P>0.05)。 6．仔鼠未接触炎症刺激剂情况下，血清中细胞因子IL-6、TNF-α和血清循环免疫复合物(CIC)水平，L=PS组、zymosan组较对照组无统计学意义差异(P>0.05)。 7．仔鼠被给予LPS1mg/kg腹腔注射后，2h、4h、8h鼠尾血清TNF-α水平，无论LPS组还是zymosan组，均较对照组水平出现显著升高(P<0.01)，相关性分析显示，血清TNF-α水平同仔鼠的血压和体重具有显著的正相关(P<0.05)。 结论 1．应用孕鼠腹腔注射LPS、zymosan，导致仔鼠出生后血压升高、体重增加，首次成功建立了母体孕期炎症免疫刺激导致子代血压升高、体重增加动物模型，为进一步开展高血压与炎症免疫相关性的研究提供了实验模型技术平台。 2．孕鼠暴露于LPS、zymosan炎症免疫刺激剂，子代大鼠在未接触炎症刺激时，其血清中的细胞因子IL-6、TNF-α及CIC水平同对照组之间无明显差别。 3．子代大鼠在接触炎症刺激剂后，实验组仔鼠较对照组仔鼠炎症免疫反应性明显增高，并且同血压水平增高密切相关，可能是导致其血压升高的机制之一。

目录

论文说明：英文缩写词表

声明

摘要

前 言

第一部分孕鼠LPS、zymosan暴露导致子代大鼠血压增高、体重增加模型的建立

材料与方法

结 果

讨 论

小 结

第二部分孕鼠LPS、zymosan暴露导致子代大鼠血压增高、体重增加的机制初步研究

材料与方法

结 果

讨论

小 结

全文总结

致 谢

参考文献

文献综述高血压与炎症

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