循环肿瘤细胞评估乳腺癌手术致微转移风险及辅助治疗疗效的临床初步研究

摘要

乳腺癌是女性发病率和死亡率最高的恶性肿瘤，复发和转移仍是导致患者死亡的首位原因。存在于患者血液、骨髓及淋巴结中不被常规手段检出的微转移正是导致患者复发、转移的重要原因。外周血标本的检测具有创伤小、便于重复采集等优势，血液中的微转移即循环肿瘤细胞(circulating tumor cell，CTC)是乳腺癌发生远处转移的重要中间环节，检测CTC并探讨其意义已成为当前临床研究的热点。既往研究显示，检测并定期监测外周血CTC水平及变化趋势有助于判断患者预后、评估治疗方案，为临床决策提供更确切的参考信息。已有研究表明，手术切除原发肿瘤会增加肿瘤细胞脱落入血风险，而乳腺癌不同手术方式致血液微转移风险是否存在差异尚未见报道。同时，有关CTC能否有效预测、评估乳腺癌辅助治疗近期疗效的研究结论尚存在较大争议。为此，本课题拟对上述问题进行初步探讨。
　　 实验方法和主要结果：
　　 1.循环肿瘤细胞评估乳腺癌手术致微转移风险差异的临床初步研究
　　 方法：110例(常规开放手术组57例；腔镜手术组53例)可手术女性乳腺癌患者分别于术前和术后12小时采集静脉血5 ml，利用密度梯度离心法富集单个核细胞，通过荧光定量PCR技术检测所获单个核细胞中细胞角蛋白(cytokeratin，CK)19 mRNA表达阳性的CTC。对比分析两组手术前后CTC检出率、检出数目及变化趋势是否存在差异。
　　 结果：两组基线信息具有可比性。常规开放手术组手术前后CTC检出率分别为22.81％(13/57)、33.33％(19/57)(P=0.211)，CTC检测数目分别为0.21(0-15.16)MCF-7细胞/2μg RNA、0.43(0-9)MCF-7细胞/2μ g RNA(P=0.123)，血液微转移风险增加者占29.8％(17/57)；腔镜手术组手术前后CTC检出率分别为24.53％(13/53)、28.3％(15/53)(P=0.659)，CTC检测数目分别为0.27(0-26.49)MCF-7细胞/2μ g RNA、0.36(0-10.56)MCF-7细胞/2μ g RNA(P=0.717)，血液微转移风险增加者占13.2％(7/53)。两组术后CTC检出率及检出数目均较术前有增高趋势，但差异尚不具统计学意义；组间比较，常规开放手术致CTC检出率及检出数目增加趋势高于腔镜手术，但差异也不具统计学意义；常规开放手术较腔镜手术增加血液微转移的风险更高(χ2=4.446，P=0.035；OR=2.79，95％CI1.05=7.42)；不同手术方式致血液微转移风险差异与患者绝经状态、区域淋巴结状态、肿瘤分期、HER=2表达状态等临床病理因素均不相关，仅与患者激素受体状态有关。
　　 2.循环肿瘤细胞评估乳腺癌辅助治疗近期疗效的Meta分析
　　 方法：计算机检索PubMed、Web of Science、EMBASE、中国生物医学文献数据库、中国期刊全文数据库等医学文献数据库截止至2012年4月公开发表的文献，同时辅助手工检索参考文献列表中的遗漏文献及圣·安东尼奥乳腺癌大会、美国临床肿瘤协会、美国癌症研究学会2000年～2011年年会的会议论文，筛选有关CTC预测、评估乳腺癌辅助治疗近期疗效的临床研究。对符合筛选条件的研究进行资料提取及质量评价后，采用Review Manager5.0软件进行Meta分析，并采用GRADE系统对证据质量进行评价。
　　 结果：共纳入24项研究，实际纳入分析乳腺癌患者共1551人，其中，评价辅助治疗前基线CTC水平与辅助治疗总有效率(Total Response Rate，TRR)、临床获益率(ClinicalBenefit Response，CBR)关系的文献分别为18篇、10篇，纳入分析患者984人、537人；评价辅助治疗期间/治疗结束后CTC水平与辅助治疗TRR、CBR关系的文献分别为13篇、7篇，纳入分析患者795人、462人。Meta分析结果显示：辅助治疗前以及治疗期间/治疗结束检测CTC阳性乳腺癌患者的近期总有效率分别是CTC阴性患者的75％(RR=0.75，95％CI0.63-0.89，P=0.001)和31％(RR=0.31，95％CI0.22-0.45，P<0.00001)，临床获益率分别是CTC阴性患者的73％(RR=0.73，95％CI0.59-0.92，P<0.00001)和53％(RR=0.53，95％CI0.42-0.67，P<0.00001)，提示乳腺癌辅助治疗前后外周血CTC检测结果阴性的乳腺癌患者，其近期总有效率和临床获益率均优于阳性患者，显示出更好的临床获益，且差异具有统计学意义。GRADE系统评价结果显示，辅助治疗前以及治疗期间/治疗结束患者CTC水平与近期总有效率关系的证据评价水平均为B，辅助治疗前、治疗期间/治疗结束患者CTC水平与近期临床获益率关系的证据评价水平分别为D和B，提示乳腺癌辅助治疗期间或结束后外周血CTC的检测结果对预测近期疗效的参考价值更高。
　　 结论：
　　 1.乳腺癌手术有增加患者外周血CTC水平的趋势，常规开放手术较腔镜手术增加血液微转移的风险更高。
　　 2.乳腺癌患者辅助治疗前后外周血CTC检测结果能够预测、评估乳腺癌辅助治疗近期疗效，辅助治疗期间或结束后CTC检测结果对预测近期疗效的参考价值更高。

目录

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论文正文 循环肿瘤细胞评估乳腺癌手术致微转移风险及辅助治疗疗效的临床初步研究

前 言

参考文献

第一部分 循环肿瘤细胞评估乳腺癌手术致微转移风险差异的临床初步研究

材料与方法

结 果

结 论

参考文献

第二部分 循环肿瘤细胞评估乳腺癌辅助治疗近期疗效的Meta分析

资料与方法

结 果

讨 论

参考文献

全文结论

致谢

照片

文献综述 乳腺癌循环肿瘤细胞生物学特性研究进展

参考文献

博士研究生期间发表论文