黄瓜霜霉病菌对氟吗啉的抗药性风险评估及氟吗啉作用机制初探

摘要

本研究探讨了专性寄生菌黄瓜霜霉病菌(Pseudoperonosporacubensis)的培养和保存方法，建立了该菌对我国创制性杀菌剂氟吗啉的敏感性基线；进行了黄瓜霜霉病菌对氟吗啉的室内和田间抗药性风险评估；明确了氟吗啉对黄瓜霜霉病菌不同发育阶段、呼吸作用和细胞膜通透性等的影响。获得了如下研究结果：　　1、采用离体叶片法、叶盘法和低温冷冻法测定了不同培养和保存条件对黄瓜霜霉病菌存活和致病力的影响。结果表明，离体叶片法适合于该菌的继代保存；低温冷冻法(-80℃，60d)可用于该菌的长期保存；离体叶盘法适用于杀菌剂对该菌的毒力测定。　　2、建立了黄瓜霜霉病菌对氟吗啉的敏感基线。采用离体叶盘法测定了采自北京、河北、内蒙等地区未使用过氟吗啉和烯酰吗啉的黄瓜栽培地的77株黄瓜霜霉病菌对氟吗啉的敏感性，结果表明，氟吗啉对供试霜霉病菌的平均EC50为0.1360±0.0487μg/mL，分布于0.0213～0.2647μg/mL之间，不同敏感性的菌株频率呈连续的单峰曲线分布，没有出现敏感性下降的抗药病原亚群体，因此可以用该单峰曲线作为田间监测黄瓜霜霉病菌对氟吗啉抗药性的敏感基线。　　3、进行了黄瓜霜霉病菌对氟吗啉的室内抗药性风险评估。　　4、黄瓜霜霉病菌对氟吗啉的田间抗药性风险评估表明，分别用氟吗啉单剂及其与代森锰锌的复配药剂连续喷施7次后，病原菌群体对氟吗啉的敏感性逐渐降低，且随着施药剂量和用药次数的增加，敏感性下降的趋势更为明显。　　5、6种染色方法对黄瓜霜霉病菌不同生长发育阶段染色效果的比较研究表明，曲利苯兰染色法适用于药剂对菌丝和吸器的形态毒力研究；荧光素钠和Calcofluor荧光染色法可用于药剂对其它无性阶段影响的研究。　　6、氟吗啉对黄瓜霜霉病菌孢子囊的呼吸作用及细胞膜通透性均没有影响。

目录

文摘

英文文摘

独创性声明和关于论文使用授权的说明

第一章前言

1.1卵菌病害的发生及危害

1.2防治卵菌病害的主要杀菌剂及其作用机制

1.3病原菌的抗药性

1.3.1抗药性基本概念及抗药性研究内容

1.3.2卵菌对内吸性杀菌剂的抗药性及治理

1.4立题依据与研究意义

1.4.1黄瓜霜霉病的化学防治及抗药性发生情况

1.4.2氟吗啉的研究进展

1.4.3研究目的和意义

第二章黄瓜霜霉病菌的分离、培养和保存及其对氟吗啉敏感基线的建立

2.1材料和方法

2.1.1试验材料

2.1.2试验方法

2.2结果与分析

2.2.1黄瓜霜霉病菌的采集和分离结果

2.2.2黄瓜霜霉病菌的培养

2.2.3黄瓜霜霉病菌菌种保存

2.2.4离体叶盘法用于黄瓜霜霉病菌对药剂敏感性测定的影响因子研究

2.2.5黄瓜霜霉病菌对氟吗啉敏感基线的建立

2.2.6交互抗药性

2.3结论与讨论

第三章黄瓜霜霉病菌对氟吗啉的室内抗药性风险评估

3.1材料和方法

3.1.1试验材料

3.1.2试验方法

3.2结果与分析

3.2.1原始菌株的敏感性测定

3.2.2菌株抗药性驯化及抗药性水平测定

3.2.3抗药性突变体的诱导及抗药性水平测定

3.2.4抗药性突变体抗性稳定性测定

3.2.5抗药性突变体致病力测定

3.2.6抗药性突变体适合度测定

3.2.7抗药性突变体的竞争力测定

3.2.8交互抗药性测定

3.3结论与讨论

第四章黄瓜霜霉病菌对氟吗啉的田间抗药性风险评估

4.1材料和方法

4.1.1供试材料

4.1.2试验方法

4.2结果与分析

4.2.1田间抗药性监测

4.2.2抗药性菌株致病力测定

4.2.3抗药性菌株适合度测定

4.2.4抗药性菌株抗药性稳定性测定

4.2.5抗药性菌株竞争力测定

4.2.6交互抗药性测定

4.3结论与讨论

第五章氟吗啉对黄瓜霜霉病菌的作用机制初探

5.1几种染色方法对黄瓜霜霉病菌不同发育阶段的染色效果比较

5.1.1材料和方法

5.1.2结果与分析

5.1.3结论与讨论

附图

5.2氟吗啉对黄瓜霜霉病菌不同生长发育阶段的影响

5.2.1材料和方法

5.2.2结果与分析

5.2.3结论与讨论

附图一

附图二

5.3氟吗啉对黄瓜霜霉病菌菌丝形态的影响

5.3.1材料和方法

5.3.2结果与分析

5.3.3结论与讨论

附图

5.4氟吗啉对黄瓜霜霉病菌孢子囊细胞膜通透性及呼吸作用的影响

5.4.1材料和方法

5.4.2结果与分析

5.4.3结论与讨论

第六章结论与讨论

6.1结论

6.2讨论

参考文献

致谢