高等植物中miRNA相关基因研究

摘要

miRNA是存在于高等生物中的一类长度约为21nt的小分子RNA。miRNA基因是由基因组编码的，其转录产物是具有茎环二级结构的miRNA前体：pri-miRNA，pri-miRNA经过一系列的加工成为成熟的miRNA分子。在植物miRNA产生过程中，RNaseⅢ类型的酶Dicer-like起着重要的作用。miRNA分子最终组装入RNA介导的沉默复合体(RISC)中，并且指导该复合体对靶基因的mRNA进行切割或抑制其翻译，以调节靶基因的表达，从而调节植物体的生长发育。 水稻OsDCL1蛋白负责水稻miRNA的加工与成熟，对水稻的正常生长发育起着重要的调控作用。为了研究水稻miRNA代谢的机理，我们首先筛选了与OsDCL1相互作用的蛋白。我们以OsDCL1蛋白的PAZ结构域作为诱饵，对水稻cDNA文库进行筛选，找到了若干个候选蛋白，并对其中的一个蛋白OsNOT2进行了互补验证。 在拟南芥和水稻中，Argonaute(AGO)蛋白由一个大的基因家族编码。AGO蛋白都具有PAZ和Piwi两个保守的结构域，AGO是RISC的核心组分，在miRNA功能途径中发挥着重要的作用。我们对拟南芥和水稻中的AGO基因家族成员进行了进化分析，确定了不同成员之间的同源关系。为了研究每个AGO蛋白在小分子RNA代谢和调节植物生长发育中的作用，我们希望鉴定在每个通路中包含的蛋白。作为第一步，我们克隆了拟南芥AtAGO7和AtAGO10基因的全长cDNA，并且在大肠杆菌系统中表达并纯化了AtAGO1蛋白的N端来用以制备抗体。

目录

文摘

英文文摘

独创性声明及关于论文使用授权的说明

第一章文献综述

第二章水稻OsDCL1蛋白PAZ结构域酵母双杂交筛选

第三章拟南芥，水稻AGO基因家族的初步研究

第四章结论

参考文献

致谢

个人简历