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消定膏对家兔骨折不同时限Cox-2/PGE2/cAMP信号转导途径及ATPasea3转运蛋白的实验研究

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前言

第一部分 立体依据

1 骨折的研究进展

2 本课题的研究的内容

第二部分 实验研究

1.技术路线图

2.材料与方法

3 结果

4.讨论

结语

1 结论

2 创新之处

3 存在的问题

4展望

参考文献

第三部分 附录

附录1

附录 2 实验动物及实验设施证明

文献综述:中西医结合治疗骨折延迟愈合及不愈合的研究进展

致谢

在学期间主要研究成果

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摘要

目的:通过建立家兔骨折模型,根据消定膏的临床疗效和现代分子生物学理论与技术立体,研究消定膏对成骨细胞 Cox-2/PGE2/cAMP信号通路及破骨细胞ATPase a3转运蛋白的作用机制,为消定膏的临床应用提供理论依据。
  方法:普通级家兔128只,随机分为空白组(A组)、模型组(B组)、青鹏膏组(C组)、消定膏组(D组)每组32只,除空白组外,其余3组采用右前尺骨离断术骨折模型。用药3天、7天、14天、28天,观察骨折部位的X线形态、骨痂的HE染色、苦味天狼星红染色的形态,以及PGE2、cAMP、Cox-2、ATPase a3转运蛋白的表达水平。
  结果:①给药3天,与空白组、模型组、青鹏膏组比较,消定膏组X线(空白组除外)、PGE2、cAMP、ATPase a3转运蛋白无统计学意义(P>0.05),在组织形态学中均见炎性细胞的浸润,在PCR中,消定膏组与其他组比较Cox-2未见上调;②给药7天,与空白组、模型组、青鹏膏组比较,消定膏组X线(空白组除外)、PGE2、cAMP、ATPase a3转运蛋白有统计学意义(P<0.05),在组织形态学中,与模型组、青鹏膏组比较,消定膏组较早出现新生的肉芽组织及少量的纤维骨痂,在PCR中,消定膏组与其他组比较Cox-2的表达上调;③给药14天,与空白组、模型组、青鹏膏组比较,消定膏组X线(空白组除外)、PGE2、cAMP、ATPase a3转运蛋白有统计学意义(P<0.05),在组织形态学中,与模型组、青鹏膏组比较,消定膏组较早出现大量的纤维骨痂及少量软骨骨痂,在 PCR中,消定膏组与其他组比较Cox-2的表达持续上调;④给药28天,与空白组、模型组、青鹏膏组比较,消定膏组X线、PGE2、cAMP、ATPase a3转运蛋白(空白组除外)有统计学意义(P<0.05),在组织形态学中,与模型组、青鹏膏组比较,消定膏组较早出现骨性骨痂和大量胶原纤维的出现,排列趋于整齐,在PCR中,消定膏组与其他组比较Cox-2的表达上调,与14天比较下调。
  结论:消定膏能较早的刺激骨折愈合部位的肉芽组织、纤维骨痂、骨性骨痂的形成,并能使PGE2、cAMP、Cox-2、ATPase a3转运蛋白的表达高峰提前出现,这可能是消定膏对骨折愈合具有较早刺激出现骨痂及细胞因子的机制之一。

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