成年小鼠睾丸间质细胞功能异质性研究

摘要

该研究首先采用逆向溶血斑法,鉴定单个间质细胞睾酮分泌上的差异,然后,在被鉴定的同一间质细胞上进行原位杂交(FlSH),以便在单个细胞水平上确定间质细胞是否存在功能及StAR基因表达的异质性.结果显示:一类间质细胞形成溶血斑,而且这类间质细胞经LH刺激后,溶血斑的面积增大,并且都能够检测到StAR mRNA及其蛋白信号,其StAR信号强弱与溶血斑的面积成正比;另一类问质细胞不能够形成溶血斑,经LH刺激后,这类间质细胞周围仍无明变化,在问质细胞中未能检测到AtAR信号的表达.因此可以说明,按照间质细胞对LH刺激的反应,至少可以将其分为两类,一类间质细胞睾酮的分泌量显著增加,其睾酮合成需要StAR的参与,即所谓的灵敏调节途径,是睾酮分泌的主要途径;另一类间质细胞没有明显的睾酮分泌或者其分泌量低于本试验的探测灵敏度,若有睾酮分泌,其分泌途径与StAR的表达无关.因此可以得出结论,机体睾丸间质细胞在睾酮分泌上并非均匀一致,其中有一类并不参与LH所调控的睾酮分泌,而可能与睾丸内细胞调节有关,然而,由于本实验未就LH受体作进一步的研究,还不能肯定这是由于该类细胞缺乏LH

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文摘

英文文摘

名词缩写

第一部分引言

一睾丸间质细胞的研究

1、雄性生殖基础

2、雄性激素的调节

3、睾丸间质细胞的形态特征

4、间质细胞中睾酮合成调节

二StAR研究

1、StAR的结构

2、StAR蛋白的作用机制

3、StAR的表达调控

4、StAR蛋白与生殖发育

第二部分实验材料与方法

一、实验材料

1、动物材料、质粒及菌株

2、酶、试剂盒、培养基、抗生素及各种化学试剂

二、实验方法与过程

1、StAR cDNA片段的回收

2、逆向溶血斑法鉴别睾丸间质细胞功能差异

3、免疫细胞化学

4、原位杂交

第三部分结果与分析

一StAR基因的克隆

二间质细胞的分离

三间质细胞睾酮分泌与LH的关系

四StAR表达与间质细胞睾酮分泌的关系

第四部分讨论与结论

一本研究采用的技术特点

二小鼠单个间质细胞之间的功能异质性

1，间质细胞睾酮分泌差异

2，间质细胞对LH敏感性的差异

3，间质细胞StAR表达的差异

三StAR在间质细胞睾酮分泌中的作用

1，不表达StAR的间质细胞对机体的影响

2，表达StAR的间质细胞对机体的影响

四结论

参考文献：

硕士在读期间发表的论文

致 谢