单层细胞共培养对猪去卵丘卵母细胞体外成熟和孤雌发育的影响

摘要

本试验比较观察第一极体(The first polar body, pbⅠ)， Oosight imaging system观察和hocchst33342染色法对第二次减数分裂中期（Metaphase II，MⅡ）卵母细胞判定结果的相关性分析，并探讨卵巢皮质细胞(porcine ovarian cortex cells, pOCCs），猪输卵管上皮细胞(porcine oviductal epithelial cells, pOECs)和猪卵丘颗粒细胞（porcine cumulus cells, pCCs）三种单层细胞体外共培养体系对猪去卵丘卵母细胞（cumulus cells denuded oocytes, Dos）体外成熟（in vitro maturation, IVM）和孤雌发育的影响。结果显示：（1）Oosight imaging system判定卵母细胞成熟的结果与hocchst33342染色法判定的结果有很强相关性（R=0.973，P＜0.01，N=90）；（2）pOCCs单层细胞共培养体系中猪去卵丘卵母细胞成熟率显著高于pOECs（52.5±0.30%vs 43.8±2.18%，P＜0.05），且这两组成熟率显著高于其余各组（P＜0.05）；Dos在三种单层细胞共培养体系培养后，成熟卵母细胞GSH含量较非共培养组都能显著升高（P＜0.05），pOCCs组GSH含量最高（7.1±0.32 pmol/卵）；（3）成熟后的Dos经孤雌激活，pOCCs组和pOECs组卵裂率和囊胚率都显著高于其余两组（P＜0.05）。