鸭疫里氏杆菌OmpA与鸭IL-2融合基因的克隆与原核表达

摘要

以鸭疫里默氏菌吉林分离株JL-RAI OmpA基因(登录号HQ707077)和鸭DulL-2成熟片段基因(登录号AY193713)为模板，分别设计带有linker的特异性引物，在OmpA基因的下游和DuIL-2基因的下游，引入互补的linker，PCR扩增出OmpA-linker基因，序列大小为1182bp和linker-DuIL-2成熟蛋白基因，序列大小为381bp。利用SOE-PCR技术，成功的构建了OmpA-DuIL-2融合基因，片段大小为1551bp，将其转入大肠杆菌表达载体pET-28a中，构建pET-OmpA-DuIL-2融合表达载体，转化至大肠杆菌Rosetta(DE3)中，IPTG诱导表达，经SDS-PAGE分析得到分子量大小约为61kDa的融合蛋白，经Western-Blot分析该融合基因同时具OmpA和DuIL-2的免疫原性。