猪β防御素2成熟肽在酵母中的表达

摘要

目的：探索毕赤酵母对pBD-2成熟肽的表达效果。方法：参考酵母偏爱密码子，设计扩增目的基因的三对引物序列，利用PCR技术扩增得到β防御2成熟肽基因，插入载体，构建了重组质粒pPIC9k-GST-pBD-2和pPIC9k-pBD-2。将线性化的重组质粒电转化到毕赤酵母KM71细胞中。筛选得到酵母阳性克隆，不断优化蛋白表达条件，以实现猪β防御素2成熟肽的表达。结论：本研究中pBD-2成熟肽基因在毕赤酵母中得到表达，克服了pBD-2天然提取繁琐，化学合成成本高等缺陷，成功构建了酵母工程菌，对后续工业化生产pBD-2成熟肽的研究具有极高的参考价值。