表达泛素(Ub)与O型口蹄疫病毒P12A3C融合基因的重组伪狂犬病毒的构建

摘要

迄今为止，已有多种外源基因在伪狂犬活病毒载体中得到有效的表达，由本实验室所构建的PRV缺失株TK-/gE-/LacZ具有遗传背景清晰，病毒稳定性好等优点，并可以诱导有效的细胞免疫和体液免疫。FMDV的主要抗原位点位于FMDV的衣壳蛋白前体p1-2a上，同时该衣壳蛋白前提可以在FMDV的3C蛋白酶的切割、加工下最终组装成病毒空衣壳，诱导机体产生免疫反应，从而P12A3C基因作为FMDV的抗原基因可诱导较高的中和抗体。同时近年来一些学者的研究表明，泛素基因与靶抗原基因融合表达，可以将靶蛋白降解为小肽，而这种小肽在诱发特异性细胞免疫方面发挥着重要的作用，基于此，本研究将泛素基因(Ub)与O型口蹄疫的主要抗原基因P12A3C串联后插入表达载体PRV缺失株TK-gE-LacZ+，得到重组病毒TK-/gE-/UbOP12A3，并通过间接免疫荧光证实P12A3C基因得到表达，而Ub基因对该基因表达后的蛋白是否发挥了降解作用，有待进一步研究。