非转座子载体介导的转基因家蚕表达hIL-28A

摘要

为了探讨非转座子载体介导转基因家蚕表达外源基因的可能性，将hIL-28A 克隆进昆虫细胞表达载体pIZT/V5-His，构建了重组载体pIZT/V5-His-hIL-28A;利用精子介导法将该重组载体导入家蚕卵，通过绿色荧光筛选并结合PCR、DNA杂交等分子鉴定，证实成功获得了转基因家蚕;Western blotting结果显示转基因家蚕表达重组hIL-28A的分子量为25 kDa，ELISA检测结果显示，hIL-28A在G3代转基因蚕、后部丝腺、脂肪组织冻干粉中的含量分别为0.198、0.320和0.238 ng/g。表明通过非转座子载体介导可以将外源基因导入家蚕基因组，并实现外源基因的表达。