家蚕模式识别受体βGRP4的序列及诱导表达分析

摘要

β葡聚糖识别蛋白(βGRP)类属于模式识别受体(PRR)，已经从很多无脊椎动物中纯化和进行了相关的研究，发现它们都具有结合β-1,3葡聚糖的能力。家蚕βGRP4开放阅读框(open reading frame,ORF)长1128bp，编码375个氨基酸，具有一个由18个氨基酸组成的信号肽，预测成熟体蛋白分子量为40.3kDa，等电点为6.5。BmβGRP4含有一个糖苷水解酶活性结构域(Glyco_hydro_16)，具有结合葡聚糖的能力。将该基因亚克隆到P28载体进行原核表达，表达出带有一个His·Tag标签的重组蛋白。给人工饲料无菌饲养的家蚕5龄第3天幼虫分别添食109个大肠杆菌、家蚕黑胸败血菌和家蚕白僵菌，对免疫诱导18h后的家蚕进行个体水平的Western blotting分析，结果表明BmβGRP4能被上述三种微生物诱导上调表达。