甜樱桃李属坏死环斑病毒(PNRSV)及李矮缩病毒(PDV)的RT-PCR检测方法的改进及应用

摘要

以山东泰安地区甜樱桃(Prunus avium L.)品种“红灯”叶片总RNA为模板,以随机六聚体引物替代特异引物进行反转录合成cDNA,采用PNRSV及PDV外壳蛋白编码基因片段引物进行PCR扩增,结果从样品中分别扩增出与预期片段大小相符的目的片段,阴性对照中无此扩增产物.对此PCR产物克隆测序分析进一步佐证了RT-PCR的检测结果.应用该方法对每个样品进行一次反转录可完成多种病毒的检测,快速、灵敏、准确、重复性好、节约检测成本,且能对病毒外壳蛋白基因表达进行相对定量.