鸡肾上皮细胞分离培养条件的优化及鉴定

摘要

鸡传染性支气管炎病毒(IBV)具有上皮细胞嗜性,一般在感染组织的上皮细胞中复制,如气管环上皮细胞、肾小管上皮细胞、绒毛尿囊膜上皮细胞和输卵管上皮细胞等.由于缺乏可供IBV复制的传代细胞系,要想从细胞水平研究IBV的致病机制等,掌握高纯度的原代上皮细胞如鸡肾上皮细胞、气管环上皮细胞等的制备技术就显得尤为关键.本项目组通过选择不同日龄的SPF鸡胚或雏鸡进行肾上皮细胞的分离,同时对血清浓度、消化酶等条件进行筛选和优化,以提高肾上皮细胞的纯度和活力,进一步对培养的肾上皮细胞采用具有EGFP标签的H120-EGFP/5a重组病毒进行鉴定.