大豆耐低磷品种低磷胁迫SSH文库构建与ESTs分析

摘要

本课题组在前期工作中，从240份大豆种质资源中筛选获得了高耐低磷品种“中黄15"。为进一步发掘和利用该品种中的耐低磷相关基因，本研究以“中黄15”为试材，利用cDNA差减文库技术，以低磷胁迫处理1h、3h、6h、12h、24h和48h的“中黄15”根系混合样品cDNA为差减杂交Tester，以适磷处理根系cDNA为Driver，构建了该品种在低磷胁迫诱导条件下的SSH差减文库。结果发现，差减文库的插入片段范围在200~1000 bp之间，平均长度在500 bp左右;选取文库中插入片段在400bp以上的阳性克隆进行测序和同源性分析发现，200个阳性克隆中，非重复ESTs序列有150条，其中79条与己知功能基因同源，25条ESTs与未知功能序列同源，46条ESTs未找到同源序列。进一步分析79条功能己知ESTs发现，其中涉及抗逆防御、蛋白合成、信号传导、蛋白修饰加工储藏、细胞生长/分裂、细胞结构、转录因子、转运相关等多个代谢途径和生理生化过程，并以参与细胞蛋白合成、植物抗病反应和信号传导等功能相关的序列所占比例最大。目前，已将116条ESTs序列提交NCBI数据库，为今后植物耐低磷相关基因克隆及其分子机制解析创建了平台。