转录因子Tbx20在动脉粥样硬化内皮细胞损伤中的保护作用及机制研究

摘要

目的:探讨Tbx20在ox-LDL诱导的人内皮细胞损伤中的作用与调控机理.方法:本研究拟从分子、细胞和整体水平，利用人脐静脉内皮细胞及动脉粥样硬化小鼠和大鼠模型，以腺病毒基因过表达、RNA干扰、免疫组化、ChIP,生物信息学分析等方法，明确Tbx20在动脉粥样硬化内皮细胞损伤中的保护作用，探讨其作用机制。结果:(1)Tbx20基因在小鼠胚胎表达十分丰富，成年后表达相应降低。Tbx20在血管(包括动脉及静脉)的内皮细胞表达十分丰富。(2)高脂高胆固醇饲养小鼠建立动脉粥样硬化模型，通过组织病理学方法检测内皮细胞损伤后Tbx20表达明显减少;(3)正常状况下，Tbx20在人脐静脉内皮细胞维持一定的表达水平，但在SOug/mL ox-LDL刺激下，其表达水平明显降低:(4)通过的腺病毒载体过表达Tbx20，可以高效的感染人脐静脉内皮细胞过表达Tbx20蛋白;(5)应用Hochest细胞核染色、DNAladdering方法，发现人脐静脉内皮细胞过表达Tbx20可以明显减轻ox-LDL所致的细胞凋亡，说明Tbx20可能对内皮细胞具有保护作用;(6)通过染色质免疫共沉淀结合基因测序、生物信息学分析发现:Tbx20可能通过转录调节方式直接作用于PPARy，增加PPARy表达，影响内皮细胞损伤和动脉粥样硬化的发生和发展。结论:转录因子Tbx20可能通过调控PPARy表达保护血管内皮细胞，抑制动脉粥样硬化的发生和发展。