辣椒疫霉Phytophthora capsici多聚半乳糖醛酸酶Pcipg5基因表达功能研究及N-糖基化突变体的构建与表达分析

摘要

辣椒疫霉Phytophthora capsici是一种重要的植物卵菌病原菌,引起多种植物病害.辣椒疫霉多聚半乳糖醛酸酶基因作为一种细胞壁降解酶在病原寄主互作过程中是一种重要的致病因子.为研究辣椒疫霉多聚半乳糖醛酸酶基因功能,从基因组文库中分离克隆Pcipg5基因表达分析.利用定点突变技术突变Pcipg5基因的一个潜在的糖基化位点(N252),构建并表达N-糖基化突变蛋白Pcipg5-N252.对突变蛋白进行温度和缓冲液体系处理并检测其活性,Pcipg5-N252蛋白在大于70℃,小于30℃温度环境下活性基本丧失;在pH值＞6的缓冲液环境下,活性很低.