干涉鸡热休克蛋白70基因表达诱导鸡胚成纤维细胞凋亡

摘要

本研究构建了表达靶向鸡HSP70的短发夹样结构小干扰,RNA(ShRNA)质粒载体系统,转染鸡胚成纤维细胞(CEF),并检测干涉HSP70表达后细胞的凋亡情况,同时用荧光定量PCR测定凋亡相关基因Caspase3和Caspase8的表达水平。结果显示：与未干涉组相比，干涉后18、24、28h，CEF细胞中HSP70的表达水平分别下降了75％、83％和96％,凋亡细胞随着干涉时间的延长而上升；与此同时,Caspase3的表达分别上调至250％、140％、和110％,而Caspase-8的表达则分别下降至76％、80％和34％。由此可见，抑制CEF中HSP70的表达可诱导细胞凋亡，主要是通过促进caspase-3的表达、抑制Caspase-8的表达实现的，因此推测鸡HSP70可能通过线粒体途径保护CEF细胞对抗凋亡。