猪链球菌2型毒力相关蛋白E的研究

摘要

猪链球菌2型是一种重要的人兽共患病原菌，目前对其致病机理尚不清楚，且发现的毒力相关因子也为数甚少。本研究通过对S.suis 2强毒菌株和无毒菌株的生物信息学分析，发现了一个新的毒力相关基因，vapE(virulence-associated protein E)。为研究其与毒力的相关性，我们利用温度敏感型穿梭自杀质粒pSET4s定点敲除S.suis 2野生型强毒株ZY458的vapE基因，构建了vapE基因缺失突变菌株458ΔvapE，并通过穿梭载体pAT18构建毒力回复互补菌株458ΔvapE(pvapE)。结果显示，接种野生株ZY458和毒力回复互补菌株458ΔvapE(pvapE)的BALB/c小鼠都出现明显的临床症状，ZY458感染组小鼠6/6死亡，458ΔvapE(pvapE)感染组小鼠5/6死亡，并且都能从各器官分离到细菌。而458ΔvapE感染组小鼠仅在感染初期出现少数临床症状，随后即恢复健康，在恢复小鼠各脏器分中分离不到细菌。试验证实，vapE基因缺失菌株毒力减弱，互补菌株的毒力恢复到野生菌株的水平。结果表明vapE基因是s.suis 2中新发现的一种毒力相关基因，可能在猪链球菌2型的分子衍化与毒力形成中起关键作用。