多重PCR技术同时检测副溶血弧菌和溶藻弧菌方法的建立与初步应用

摘要

为建立多重PCR方法用于同时快速检测海产品中的副溶血弧菌和溶藻弧菌，本研究根据副溶血弧菌(vP)和溶藻弧菌(vA)的toxR基因序列应用Primer Premier6.0设计了针对这2种细菌的2对特异性引物，建立了能快速同时检测这两种细菌的多重PcR方法，并对该反应体系的特异性和灵敏度进行分析。结果显示纯培养细菌的检测灵敏度分别为VP 2．32×103cfu/mL和VA2.56×103cfu/mL，临床病料检测灵敏度分别可达VP2cfu/mL，和vA 3cfu/mL;与枸橼酸杆菌、沙门氏菌、美人鱼弧菌、霍乱孤菌、麦氏弧菌没有交叉反应。研究表明本实验方法操作简便快速、特异性强、灵敏度高、稳定性好，并且经济实惠每个PCR反应成本不到1元，值得推广应用。