绿色巴夫藻中△5-脂肪酸延长酶基因的克隆及功能鉴定

摘要

本文根据己经报道的△5-脂肪酸延长酶基因设计引物，从绿色巴夫藻cDNA中扩增得到该基因片段，序列分析表明：结构基因全长840bp，编码279个氨基酸；与己经报道的其它△5-脂肪酸延长酶相比，该延长酶仍然存在典型的组氨酸和酪氨酸保守区序列以及内质网定位的MYXYY序列，但是在N端和C端序列却存在较大差异。利用酿酒酵母的表达载体pYES2.0,在选择培养基中筛选得到酿酒酵母转化菌株YElo5。脂肪酸甲酷气相色谱分析表明该基因在酿酒酵母中获得了高效表达，可以将EPA转化成二十二碳五烯酸，其底物的转化率达到了25.6%，转化率明显高于己经报道的其它△5-脂肪酸延长酶。