HBx基因及其缺失突变体(HBx-d382)影响着L02细胞microRNA表达谱

摘要

目的:研究转染HBx基因(hepatitis B virus X gene)及其缺失突变体(HBx-d382)后L02细胞microRNA表达谱变化。方法:通过脂质体转染和G418筛选获得102/HBx、L02/HBx-d382阳性克隆,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和western blot鉴定目的基因表达,利用microR NA芯片技术检测其对L02细胞microRNA表达的影响.结果:RT-PCR及Western-blot表明在L02/HBx和L02/HBx-d382细胞株中存在目的基因表达.microRNA芯片发现与L02细胞相比,L02/HBx-d382细胞有7个microRNA表达上调,5个microRNA表达下调,L02/HBx细胞有4个microRNA表达上调,12个microRNA表达下调.结论:成功构建HBx基因及其缺失突变体(HBx-d382)的真核表达模型,该类病毒基因会影响L02肝细胞microRNA的表达谱.