禽流感病毒H5N1基因突变对神经氨酸酶抑制剂敏感性和神经氨酸酶活性的影响

摘要

目的：研究感染人的禽流感病毒H5N1神经氨酸酶突变1117V,1314V,1117V+1314V对神经氨酸酶抑制剂(NAIs)敏感性和神经氨酸酶(NA)活性的影响。方法：定点突变技术将变异位点引入禽流感病毒株A/Vietnam/1203/04 (H5N1)(VN 1203)的NA基因中,以A/WSN/33(H1N1)为背景,通过反向遗传学方法构建重组流感病毒,鸡胚传代增殖病毒,荧光定量评估病毒对NAIs的敏感性和NA活性(IC50值和Km,Ki值).结果：与野生株VN 1203相比,I117V使NA对奥司他韦敏感性降低(IC50值升高了17倍,Ki值升高了20倍),对扎那米韦敏感性无明显影响(IC50值升高了2倍,Ki值升高了3倍),NA活性降低(Km值升高了23倍).1314V对NAIs敏感性和NA活性均无明显影响.结论：初步结果认为NA突变I117V和I314V对感染人的禽流感病毒H5N1并不产生NAIs耐药,临床上仍然可以用奥司他韦或扎那米韦抗病毒治疗.