辅助生殖技术及自然妊娠早孕期绒毛、中孕期胎儿组织DNMT-3基因启动子SNP的研究

摘要

DNA甲基转移酶(DNMT)-3A与DNMT-3B是催化重新甲基化的DNA甲基转移酶,对基因组甲基化模式的形成、胚胎形成及许多病理发生中的甲基化进程起着关键作用.DNMT-3A、3B启动子区一些单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)可改变启动子的转录活性,使DNMTs表达增加、基因组DNA甲基化模式改变,从而导致各种疾病的发生.本研究以人类ART来源和自然妊娠来源的早孕期绒毛组织、中孕期胎儿肌肉组织为研究对象,采用PCR结合限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)方法检测这些样本中DNMT-3A和3B基因启动子-448A＞G位点和-149C＞T位点的单核苷酸多态性,以探讨此两个位点与人类早中期妊娠丢失的相关性,及ART技术对DNMT-3A和3B多态性的影响,为进一步了解早中期妊娠丢失的发生机制提供依据.研究表明：(1)DNMT-3A基因启动子区-448A>G位点SNP在早／中期妊娠丢失中可能发挥了一定作用，其途径即可能通过改变印记基因的甲基化状态，从而影响印记基因的表达；ART技术并未影响胚胎停育及正常妊娠中该位点基因型的分布；(2)目前尚无研究报道DNMT-3B基因启动子区-149C/T位点SNP在人早孕期绒毛组织及中孕期胎儿组织中的基因型，通过本研究结果推测，不排除DNMT-3B启动子区该位点突变型可能代表了早中期胎儿生长发育中的正常变异；(3)本研究仅限于对DNMT-3A、3B基因启动子区DNA水平的研究，进一步的工作需要对DNMT-3A、3B基因表达及酶活力检测，以证实上述的初步研究结论。