固氮施氏假单胞菌glnD基因突变株构建及表型分析

摘要

GlnD蛋白是一种具有尿苷酞化及去尿苷酞化的双功能酶(UTase/UR)，该蛋白可对PII蛋白行使可逆的尿苷酞化与去尿苷酞化作用，对与氮的吸收和利用相关过程有着非常重要的调控作用。施氏假单胞菌A1501为本实验室自南方水稻根际土壤分离到的一株联合固氮菌，属于变形细菌Y亚族。该菌在无按和微好氧条件下，能将空气中的氮气固定为植物可利用的铵。本实验利用自杀质粒pK18mobsacB构建体外重组载体，并通过与A1501野生型发生同源重组结合转移的方法构建了带有氯霉素(Cm)抗性的glnD缺失突变株。并对glnD缺失突变株进行了表型分析，结果显示，与野生型A1501相比，glnD的缺失突变株中fleQ等鞭毛合成相关调控基因的表达量下调。以上实验结果表明，glnD基因在A1501的固氮基因表达调控及相关代谢过程中起着非常重要的作用，其具体的作用机制待于进一步的研究。