检测炭疽杆菌双重实时荧光PCR方法的建立

摘要

目的：建立同时检测炭疽杆菌capA基因、PA基因的双重实时定量荧光PCR方法。方法：设计和合成分别针对炭疽杆菌capA基因、PA基因的引物对和荧光双标记探针,构建质粒标准品,通过优化探针、引物浓度,反应体系试剂组分等参数,建立可同时检测capA基因、PA基因的双重实时荧光PCR方法,测试敏感性和特异性,并初步应用于实战检测。结果：双重实时荧光定量PCR的检测capA基因、PA基因的敏感性分别可达到20和40模板拷贝每反应,并具有良好的特异性和稳定性,在重大保障活动中得到检验。结论：双重实时荧光定量PCR具有可以同时筛查、经济、快速、特异性强等优点,在炭疽杆菌检测方面有巨大应用价值。