人工关节感染清创+间隔器植入后金葡菌的遗传性状研究

摘要

目的:研究首次清创术后金葡菌的基因学变化特征和菌株间的克隆关系,为人工关节感染的病因学和流行病学研究提供参考.rn 方法:建立兔膝关节置换术后感染模型,采用过氧化氢实验、凝固酶实验、和PCR测序23S rRNA基因、nuc基因鉴定金葡菌,二期翻修手术间隔器植入2月后活检培养、PCR的方法探索细菌的遗传性状、毒素和致病相关基因(clfA、coa、sea、seb,、sec、seh、see、eta、etb、fnbA、hla、hlb、cap5、cap8),采用扩增片段长度多态性分析(Amplified FragmentLength Polymorphism,AFLP)的方法,探索人工关节术后感染相同的金葡菌,经过治疗后菌株间的基因关系,探索细菌在治疗中发生的变异.rn 结果:培养的感染发生率为18.3%.所有菌株为过氧化氢、凝固酶阳性的革兰氏阳性球菌,37号菌株伤口周围渗液培养得到革兰氏阴性杆菌;所有革兰氏阳性菌株PCR扩增23S rRNA基因和nuc基因均为阳性,所有细菌的凝聚因子(clfa)基因均阳性;凝固酶(coa)基因扩增得到了三种基因;肠毒素基因得到se(a,h)和seh亚型;eta基因、etb基因、fnbA基因、fnbB基因、hla基因、hlb基因、cap5和cap8基因的阳性率不同,分别为36%、64%、55%、36%、82%、100%、18%.AFLP得到9个聚类,各组间距离均小于20,细菌在治疗过程中发生变异.rn 结论:假体周围感染翻修以后,残留的细菌发生变异,这可能与感染复发相关,还可能和细菌的耐药性相关.异种细菌污染后,变异表现的更加明显.感染后反复的关节液培养及耐药实验,对合理使用抗生素是非常重要的.