牛传染性鼻气管炎病毒壳膜蛋白VP8的抗血清制备

摘要

牛传染性鼻气管炎病毒(Infectious Bovine Rhinotracheitis Virus,IBRV)是牛传染性鼻气管炎的病原体,IBRV壳膜蛋白VP8在病毒复制及致病过程中发挥重要作用.本研究将表达IBRV VP8基因的重组表达质粒pET-32a-VP8转化入表达宿主Transetta(DE3)菌株内,采用37°C,IPTG浓度为1.0mol/L诱导表达.将表达产物通过镍离子亲和层析纯化.然后将纯化的VP8融合蛋白免疫Babl/c小鼠制备抗血清.结果表明,重组蛋白VP8以包涵体的形式存在,其相对分子质量约110kDa,Western-blot分析结果表明:该蛋白与抗IBRV的血清能发生特异性反应,以其所制备的抗血清与IBRV及病毒壳膜蛋白VP8特异性结合.研究结果说明,获得的IBRV VP8蛋白具备良好的免疫原性,所制备的抗血清将为研究IBRV致病机理奠定基础.