土壤烟草根黑腐病菌的real-time PCR分子检测

摘要

本试验依据烟草根黑腐病菌[T.basicola]与其它真菌在的ITS序列上的差异设计了一对特异性引物TbF/TbR,结果表明Phytophthora parasitica var.nicotianae、Fusarium oxysporum、Fusarium graminearum、Sclerotinia sclerotiorum(Lib.)de Bary、Rhizoctonia solani Kühn等真菌和无菌水对照均无扩增产物,且T.basicola扩增出一条150bp左右的特异性条带.再用TbF/TbR对不同浓度梯度的T.basicola的分生孢子DNA进行real-time PCR,结果表明该引物对T.basicola的分生孢子灵敏度为1个/反应体系,并且得到土壤中T.basicola孢子的标准曲线:y=-1.5206x+24.919.